Islet-1诱导C3H10T1/2心肌样细胞分化中Akt参与干性维系的研究

发布时间：2021-10-26 16:55

　　第一部分Islet-1诱导C3H10T1/2心肌样分化过程Akt参与干性维持的作用研究目的:探究在Islet-1诱导的C3H10T1/2心肌样细胞分化过程中Akt与干性因子的表达调控是否相关。方法:在C3细胞中转染过表达Islet-1的慢病毒,构建心肌样细胞分化模型,通过反转录定量PCR（RT-qPCR）检测蛋白激酶（Akt）及干性因子Sox2,Nanog的基因表达;western blotting检测Akt及干性因子的蛋白表达;免疫荧光检测干性因子及Akt的定位改变。采用Akt激活剂SC79与抑制剂MK2206分别作用于C3细胞,western blotting检测p-Akt表达情况以摸索出药物最佳浓度;以两种药物的最佳浓度分别作用于C3细胞后,RT-qPCR检测干性因子基因表达,western blotting检测干性因子蛋白表达,免疫荧光检测干性因子定位改变。结果:转入Islet-1后C3发生了心肌样细胞分化,分化过程中Akt活性及入核量降低,但干性因子的基因表达、蛋白表达、细胞定位均未发生改变;摸索出的SC79最佳作用浓度为4ug/ml,MK2206最佳作用浓度为1umol/L... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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21图 2 Islet-1 蛋白表达水平Fig.2 protein level of Islet-1 expression2.2 转染病毒后心肌早分化相关基因的表达转染慢病毒后，连续培养四周，对心肌早期分化的标志进行 mRNA 水平和蛋白水平的检测。RT-qPCR 结果提示，心肌早期分化标志 GATA4, Mef2C 在第三周

重庆医科大学硕士研究生学位论文最高（图 3），P<0.05，差异有统计学意义；免疫荧光结果显示蛋白 cTnT 的表达，而肌联蛋白 CX43 的表达较弱，转入过表达出现了 cTnT 的表达（图 4），CX43 的表达也大大增强（图 5）et-1 后细胞在有心肌早期分化相关基因的 mRNA 表达，也有心肌的表达，C3 细胞出现心肌样分化。

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]杜仲叶提取物及其单体槲皮素、（+）-丁香脂素抑制BMSCs成脂分化研究[D]. 方宁.南昌大学 2014



本文编号：3459863