金黄色葡萄球菌Cna基因的生物信息学分析及原核表达

发布时间：2021-10-31 22:25

　　[目的]对金黄色葡萄球菌的Cna基因进行生物信息学分析,并进行克隆和原核表达,为金黄色葡萄球菌重组疫苗的研发提供参考数据。[方法]使用Protparam、PSORT、Signal P-5.0、TMpred、Net Phos 3.1 Server、PSIPRED、SWISSMODEL等在线生物信息软件,分析Cna蛋白的理化性质、亚细胞定位、跨膜区域、磷酸化修饰位点、二级结构和三维结构。以基因组DNA为模板扩增Cna基因编码N1-N2子域的片段,扩增产物经酶切回收后与载体p ET-32a（+）相连接,构建重组表达质粒,将该重组质粒转化E.coli TG1,经菌落PCR、测序鉴定后,增菌培养并抽提质粒,再转化E.coli BL21（DE3）,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析。[结果]Cna蛋白由1 183个氨基酸残基组成,相对分子质量为133 006.82 Da,等电点为5.89,负电荷氨基酸残基数为180个,正电荷氨基酸残基数为167个,分子式:C5863H9241-N1569O1936S10,原子总数18 619个,是一种稳定的亲水蛋白质,定位于细胞膜上,第4～23、1 15... 

【文章来源】：生物技术. 2020,30(04)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

Cna的信号肽预测结果

在线生物分析软件TMpred预测Cna蛋白跨膜区的结果显示，该蛋白共有2个典型的跨膜螺旋区域，分别由第4～23位、第1 158～1 177位氨基酸残基形成(图2)。图3 Cna蛋白的磷酸化位点预测结果

Cna蛋白的磷酸化位点预测结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白PBPX基因的克隆与表达[J]. 李文通,盛佩群,羊晓敏,陈逸璐,何文迪,夏佳音,陈新江.  生物技术. 2018(05)



本文编号：3468970