胰岛样结构分泌功能的初步评价
发布时间：2021-11-07 03:03
目的:以胰腺组织裂解液定向诱导骨髓间充质干细胞分化,形成胰岛样结构并对其进行评价,探究分化过程中细胞形态变化的规律;探讨胰岛样结构的形态变化与内分泌功能的关系。方法:采用胰腺组织裂解液,诱导骨髓间充质干细胞定向分化为胰岛样结构;倒置相差显微镜下观察细胞、结构的变化;以石蜡包埋切片并HE染色,观察组织结构和细胞形态;以双硫腙染色对分化形成的细胞团进行初步筛选;Mallory染色鉴别细胞及分布;使用免疫细胞化学染色技术检测Insulin、C-peptide、Glucagon、和Somatostatin蛋白;实时荧光定量PCR检测Pdx1、Ngn3、MaFA、Nkx6.1、Insulin、Glucagon、Somatostatin、GLUT-2基因的表达;酶联免疫吸附实验检测细胞培养液中Insulin和C-peptide,以评价胰岛样结构的分泌功能。结果:1.诱导分化过程中,细胞形态变化规律。诱导早期,散在的细胞增多并聚集成细胞团;细胞团收缩、细胞密度增加,逐渐形成有被膜包绕的结构。2.胰岛样结构内可检测到Insulin、C-peptide、Glucagon、Somatostatin阳性细胞...
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：99 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
散在的细胞、简单聚集的细胞团、收缩的细胞团、膜包的细胞团Insulin免疫荧光染色Fig.4-aInsulinimmunofluorescencestainingofscatteredcells,simpleaggregatedcellmass,contractedcellmass,andmembrane-packedcellmass.
43图 4-b 散在的细胞、简单聚集的细胞团、收缩的细胞团、膜包的细胞团 C-peptide 免疫荧光染色Fig. 4-b C-peptide immunofluorescence staining of scattered cells, simple aggregated cell mass, contractedcell mass, and membrane-packed cell mass.
45图 4-c 散在的细胞、简单聚集的细胞团、收缩的细胞团、膜包的细胞团 Glucagon 免疫荧光染色Fig. 4-c Glucagon immunofluorescence staining of scattered cells, simple aggregated cell mass, contractecell mass, and membrane-packed cell mass.
【参考文献】：
期刊论文
[1]胰岛细胞与骨髓间充质干细胞联合移植治疗糖尿病的进展[J]. 施静,姚豫桐,冯天航,魏玲玲,赖春友,邓绍平,黄孝伦. 中国普外基础与临床杂志. 2018(05)
[2]不同诱导剂定向诱导BMSCs分化为胰岛样结构的比较[J]. 王慧丰,吴丽情,徐亦辰,韦雅淑,刘红静,赵文婧,陈维平. 基因组学与应用生物学. 2018(04)
[3]PDX-1基因转染人脂肪间充质干细胞向胰岛样细胞分化及移植治疗1型糖尿病[J]. 史光军,白国立,谭雪莹,朱继军,许评. 中国组织工程研究. 2017(13)
[4]DMSO联合高糖体外诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的研究[J]. 于文浩,王亚丹,虎啸,张宁,薛永康,朱邯豫,赵玉玺,王新庄. 中国细胞生物学学报. 2016(11)
[5]体外定向诱导小鼠胰腺干细胞分化形成胰岛样结构[J]. 吴丽情,寇亚丽,赵文婧,吴卓,徐亦辰,陈维平. 基础医学与临床. 2015(12)
[6]干细胞治疗糖尿病的研究现状及展望[J]. 刘晓芳,王韫芳,李亚里,裴雪涛. 中国科学:生命科学. 2013(04)
[7]心肌组织裂解液诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化[J]. 李琴,赵文婧,寇亚丽,胡利霞,陈维平. 中国组织工程研究与临床康复. 2011(10)
[8]移植共培养的骨髓间充质干细胞与胰岛细胞对糖尿病大鼠的降血糖作用[J]. 李伟娟,田烁,刘阁玲,路一芳,肖红珍. 吉林大学学报(医学版). 2010(06)
[9]不同微环境对骨髓间充质干细胞分化为产胰岛素细胞的影响[J]. 黄盛,郑伟,范志勇,张福琴,窦科峰,宋振顺. 中华实验外科杂志. 2008 (03)
[10]Mallory氏胰岛细胞染色法的改良[J]. 柳洁,张雪梅,李莉. 现代生物医学进展. 2007(12)
博士论文
[1]PDX-1、NeuroD1及MafA转导小鼠骨髓间充质干细胞及小鼠iPS细胞制备胰岛素分泌细胞的实验研究[D]. 范向军.苏州大学 2013
[2]四种方案诱导人胎盘间充质干细胞向胰岛β样细胞分化[D]. 陆琰.暨南大学 2009
硕士论文
[1]骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞过程中GATA-4和a-MHC的表达[D]. 刘玲珑.广西医科大学 2015
[2]定向诱导间充质干细胞向心肌细胞方向分化过程中Nkx2.5的表达[D]. 吴卓.广西医科大学 2013
本文编号：3481033
【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区
【文章页数】：99 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
散在的细胞、简单聚集的细胞团、收缩的细胞团、膜包的细胞团Insulin免疫荧光染色Fig.4-aInsulinimmunofluorescencestainingofscatteredcells,simpleaggregatedcellmass,contractedcellmass,andmembrane-packedcellmass.
43图 4-b 散在的细胞、简单聚集的细胞团、收缩的细胞团、膜包的细胞团 C-peptide 免疫荧光染色Fig. 4-b C-peptide immunofluorescence staining of scattered cells, simple aggregated cell mass, contractedcell mass, and membrane-packed cell mass.
45图 4-c 散在的细胞、简单聚集的细胞团、收缩的细胞团、膜包的细胞团 Glucagon 免疫荧光染色Fig. 4-c Glucagon immunofluorescence staining of scattered cells, simple aggregated cell mass, contractecell mass, and membrane-packed cell mass.
【参考文献】：
期刊论文
[1]胰岛细胞与骨髓间充质干细胞联合移植治疗糖尿病的进展[J]. 施静,姚豫桐,冯天航,魏玲玲,赖春友,邓绍平,黄孝伦. 中国普外基础与临床杂志. 2018(05)
[2]不同诱导剂定向诱导BMSCs分化为胰岛样结构的比较[J]. 王慧丰,吴丽情,徐亦辰,韦雅淑,刘红静,赵文婧,陈维平. 基因组学与应用生物学. 2018(04)
[3]PDX-1基因转染人脂肪间充质干细胞向胰岛样细胞分化及移植治疗1型糖尿病[J]. 史光军,白国立,谭雪莹,朱继军,许评. 中国组织工程研究. 2017(13)
[4]DMSO联合高糖体外诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的研究[J]. 于文浩,王亚丹,虎啸,张宁,薛永康,朱邯豫,赵玉玺,王新庄. 中国细胞生物学学报. 2016(11)
[5]体外定向诱导小鼠胰腺干细胞分化形成胰岛样结构[J]. 吴丽情,寇亚丽,赵文婧,吴卓,徐亦辰,陈维平. 基础医学与临床. 2015(12)
[6]干细胞治疗糖尿病的研究现状及展望[J]. 刘晓芳,王韫芳,李亚里,裴雪涛. 中国科学:生命科学. 2013(04)
[7]心肌组织裂解液诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化[J]. 李琴,赵文婧,寇亚丽,胡利霞,陈维平. 中国组织工程研究与临床康复. 2011(10)
[8]移植共培养的骨髓间充质干细胞与胰岛细胞对糖尿病大鼠的降血糖作用[J]. 李伟娟,田烁,刘阁玲,路一芳,肖红珍. 吉林大学学报(医学版). 2010(06)
[9]不同微环境对骨髓间充质干细胞分化为产胰岛素细胞的影响[J]. 黄盛,郑伟,范志勇,张福琴,窦科峰,宋振顺. 中华实验外科杂志. 2008 (03)
[10]Mallory氏胰岛细胞染色法的改良[J]. 柳洁,张雪梅,李莉. 现代生物医学进展. 2007(12)
博士论文
[1]PDX-1、NeuroD1及MafA转导小鼠骨髓间充质干细胞及小鼠iPS细胞制备胰岛素分泌细胞的实验研究[D]. 范向军.苏州大学 2013
[2]四种方案诱导人胎盘间充质干细胞向胰岛β样细胞分化[D]. 陆琰.暨南大学 2009
硕士论文
[1]骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞过程中GATA-4和a-MHC的表达[D]. 刘玲珑.广西医科大学 2015
[2]定向诱导间充质干细胞向心肌细胞方向分化过程中Nkx2.5的表达[D]. 吴卓.广西医科大学 2013
本文编号：3481033
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教材专著
