Nedl1基因敲除鼠匹鲁卡品癫痫模型的建立

发布时间：2021-11-09 05:29

　　目的通过Nedl1（NEDD4-like ubiquitin protein ligase-1）基因敲除鼠(Nedl1^-/-)构建匹鲁卡品癫痫模型,探讨Nedl1基因与癫痫之间的关系。方法 C57BL/6小鼠通过Cre-Loxp系统构建Nedl1^-/-小鼠。选择相同年龄野生型小鼠(Nedl1^+/+)及Nedl1^-/-小鼠,腹腔注射匹鲁卡品诱导癫痫发作,对两组小鼠癫痫发作情况进行统计,并且对比未造模时及癫痫模型建模1个月后两组小鼠海马Nissl染色、NPY（neuropeptide Y）染色。结果与Nedl1^+/+小鼠相比,Nedl1^-/-小鼠癫痫发作等级较轻（P=0.000）,癫痫发作次数较少（P=0.004）,首次出现3级以上发作的时间较长（P=0.016）。癫痫模型建模后Nedl1^-/-小鼠全部存活,而Nedl1^+/+小鼠死亡率为46.4%。癫痫模型建模后1个月Nissl染色显示Nedl1^+/+

【文章来源】：解放军医学院学报. 2020,41(06)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

癫痫模型后1个月海马NPY免疫荧光染色(n=3)

选择Nedl1+/+小鼠(28只)和Nedl1-/-小鼠(17只)进行匹鲁卡品癫痫模型制作,腹腔给药后几分钟,小鼠出现活动减少,尾巴伸直、点头、腹部贴地爬行、全身抖动,偶尔出现阵挛发作。通过对不同基因型的小鼠癫痫模型后2 h发作情况进行统计。癫痫发作等级:Nedl1-/-小鼠癫痫发作等级显著低于Nedl1+/+小鼠(3.40±0.36 vs 3.90±0.16)(P=0.000);2 h内3级及以上癫痫发作的次数:Nedl1-/-小鼠癫痫发作次数显著少于Nedl1+/+小鼠(13.05±7.84 vs 20.00±8.47)(P=0.004);首次出现3级以上发作的时间:Nedl1-/-小鼠所用时间明显长于Nedl1+/+小鼠(42.23±15.48 vs 24.4±17.06)(P=0.016),差异均有统计学意义。癫痫模型后Nedl1-/-小鼠全部存活,而Nedl1+/+小鼠死亡13只(46.4%)(图1)。2 癫痫模型后小鼠脑组织Nissl染色比较

选择未造模及癫痫模型后1个月的Nedl1+/+小鼠和Nedl1-/-小鼠各组3只,取脑组织进行Nissl染色。癫痫模型后1个月,低倍镜下观察(40×)见Nedl1+/+小鼠与Nedl1-/-小鼠海马区域整体结构无明显差异;高倍镜下观察(400×)可见Nedl1+/+小鼠CA1区、CA3区和DG区细胞着色增加,细胞排列紊乱,并且DG区的细胞明显固缩,细胞形态改变。癫痫模型后1个月,Nedl1+/+小鼠海马CA1区细胞计数明显低于Nedl1-/-小鼠(P=0.03),并且较未造模时期明显减少(P=0.01)。癫痫模型后1个月,Nedl1+/+小鼠及Nedl1-/-小鼠海马CA3区、DG区细胞计数无明显差异,与未造模时期相比无明显变化(P>0.05)(图2)。3 癫痫模型后小鼠脑组织NPY免疫荧光染色比较


本文编号：3484720