IL-6磁微粒化学发光定量检测方法的建立和评价

发布时间：2021-11-17 22:43

　　目的:建立并评价基于磁微粒化学发光免疫分析（CLIA）平台的IL-6定量检测方法。方法:以抗人IL-6抗体包被的磁微粒、待检血清及辣根过氧化物酶标记的IL-6抗体组成分析体系,基于CLIA平台,采用双抗体夹心模式,建立IL-6抗原定量检测方法,并对其进行条件优化和性能评价。结果:该方法的LoB、LoD、FS分别为0.5 pg/ml、2 pg/ml、2.5 pg/ml;分析内、分析间变异及总不精密度分别≤7%、≤10%、≤12%;线性范围为3～1 000 pg/ml,最大稀释倍数为8倍;回收率在（100±15）%以内;标本中的血红蛋白、三酰甘油、胆红素浓度分别为200 mg/dl、2 000 mg/dl、45 mg/dl时,其检测结果无显著影响;本研究与罗氏同时检测临床标本,其结果的拟合曲线回归方程为:Y=0.955X+9.263,R²=0.993 2。结论:本研究建立的IL-6磁微粒化学发光定量检测方法性能良好,具有一定的临床意义,可满足临床检测IL-6水平的需要。 

【文章来源】：中国免疫学杂志. 2020,36(16)北大核心CSCD

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【部分图文】：

IL-6磁微粒化学发光检测试剂条件优化

按照CLSI EP17-A文件,对灵敏度的测试结果进行分析和计算,得到LoB、LoD、FS各为0.5 pg/ml、2 pg/ml、2.5 pg/ml。表1 IL-6酶标记抗体浓度检测结果Tab.1 Results of labeled antibody concentrations Samples Labeled antibody concentrations (μg/ml) 0.6 0.4 0.2 0.1 0.05 0 28 880 16 224 8 032 5 650 6 275 P1 135 675 123 568 92 229 66 367 53 917 P2 220 947 200 756 159 483 119 167 102 161 P3 1 690 061 1 670 199 1 468 695 1 159 082 1 017 355 P4 7 730 594 7 421 903 6 126 611 4 447 685 4 046 161 P5 15 949 264 16 061 307 13 903 956 11 433 629 10 422 551 P/N 7.65 12.37 19.86 21.09 16.28

准备IL-6浓度高、低值血清待测标本,分别将不同浓度的血红蛋白、三酰甘油、 胆红素加入2份待测标本中作为干扰标本,同时以添加相同体积的体系缓冲液作为基础标本,来得到干扰率,由表6可知,血红蛋白、三酰甘油、胆红素浓度分别≤200 mg/dl、2 000 mg/dl、45 mg/dl时,干扰率≤15%IL-6的检测结果无显著影响。2.3.7 方法学比对

【参考文献】：
期刊论文
[1]感染相关生物标志物临床意义解读专家共识[J]. 刘又宁,解立新.  中华结核和呼吸杂志. 2017 (04)



本文编号：3501767