小鼠胚胎干细胞定向血管内皮和造血细胞分化体系的建立

发布时间：2021-11-18 02:38

　　研究背景:在血管发生和重塑的过程中,血管内皮细胞（endothelial cell,EC）起源于血液血管母细胞（hemangioblast,HA）。但由于缺乏对这一发育过程诸多细节的深入了解,因而成熟的血管内皮在体外扩增十分困难,极大地限制了它的功能研究和临床应用。近年来,多项研究表明哺乳动物成体血管内皮中存在一群具有特定分子表型的“血管内皮干细胞（vascular endothelial stem cell,VESC）”,表达Kit（也称CD117）、Procr（也称EPCR、CD201）等分子,能在体外形成稳定克隆并产生数千万的子代内皮细胞。不仅如此,VESC还具有分化为原代内皮细胞和周细胞的双向潜能,可以在体内产生功能性血管,这为组织工程化血管和临床治疗提供了新的研究方向。造血细胞（hematopoietic cell,HC）的起源与血管内皮密不可分。目前的主流观点认为,造血细胞是由中胚层来源、功能特化的生血内皮（hematopoietic endothelium,HE）通过内皮-造血转化（endothelial to hematopoietic cell transition,... 

【文章来源】：军事科学院北京市

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

胚胎干细胞向中胚层祖细胞诱导分化流程图

霉素 C 处理过，因而复苏后不再分裂增殖，情况 次性复苏 2 管 MEF，以维持饲养层细不规则克隆增殖，当 MEF 密度较大时，ESC折光率低），与周围细胞界限清楚。ESC 般 3×105/孔），传代时须复苏新的 MEF 以维持 MEF 起消化冻存，再次复苏使用时仍需加入干细胞诱导 4 天后形成大量拟胚体克隆细胞系 R1/E 于 6 孔板内复苏 2d 后，细胞正Petri dish 中改用无血清的 StemPro+四因子培养导 ESC 向中胚层细胞 EB 分化。前 2 天不换拟胚体以肉眼可见的速度迅速增殖，细胞间粘，折光性强，与周围界限清晰，且无自发分化我们的无血清培养基配合四因子的诱导体系成功内皮和造血细胞诱导分化奠定了基础。

拟胚体定向内皮细胞诱导分化流程图


本文编号：3502038