rhPGRN通过MAPK/PI3K通路调控自噬和内质网应激并促进细胞增殖

发布时间：2021-11-23 09:48

　　目的:探讨重组人颗粒体蛋白前体（rhPGRN）对人软骨细胞C28I2和小鼠巨噬细胞RAW264. 7增殖、自噬和内质网应激（ERS）的影响及作用机制。方法:采用Ni-NTA琼脂糖树脂对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,通过考马斯亮蓝染色、BCA法和Western blot验证目的蛋白的浓度和纯度。将细胞随机分为对照组、rhPGRN组、U0126组、3-甲基腺嘌呤（3-MA）组、rhPGRN+U0126、rhPGRN+3-MA、rhPGRN+巴弗洛霉素A1（Baf-A1）和rhPGRN+4-苯基丁酸（4-PBA）组,采用细胞计数法、Western blot和RT-qPCR检测rhPGRN对C28I2和RAW264. 7两种不同类型细胞增殖、自噬和ERS的影响。结果:（1）在含有His标签的PGRN稳转细胞株中成功提取高纯度、具有生物活性的人源重组蛋白rhPGRN。（2）rhPGRN能促进C28I2和RAW264. 7细胞的增殖,促进细胞周期相关分子（PCNA、cyclin B1和cyclin D1）的mRNA表达（P<0. 05）,上调细胞周期调控蛋白Ki67表达,并提高增殖相关信... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2020,36(06)北大核心CSCD

【文章页数】：11 页

【部分图文】：

rhPGRN的纯度及浓度鉴定

rhPGRN对C28I2和RAW264.7细胞增殖的影响

rhPGRN对C28I2和RAW264.7细胞增殖相关信号通路的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]PGRN基因沉默对人非小细胞肺癌A549细胞增殖及迁移的影响[J]. 孙艳婷,陈思成,李汪,李具琼,朱颖,施琼.  中国病理生理杂志. 2018(04)
[2]过表达PGRN抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤[J]. 尚立群,张永庆,苗毅,杨淑梅.  中国病理生理杂志. 2017(05)



本文编号：3513628