人神经干细胞源施万样细胞诱导分化及施万样细胞微囊泡对轴突再生作用研究
发布时间：2021-12-31 22:41
研究背景:在周围神经系统（peripheral nervous system,PNS）损伤中,轴突再生是神经功能恢复的基本过程。神经干细胞（neural stem cells,NSCs）在体外能够发挥分化成各种神经细胞,例如神经元和少突胶质细胞等神经胶质细胞。目前,已经广泛利用这些能力来产生用于临床应用的各种神经细胞并且作为治疗神经疾病的潜在手段。在周围神经再生中,施万细胞（schwann cells,SCs）与神经的再生紧密联系,它沿神经元的突起分布,包裹在神经纤维上形成髓鞘。SCs能通过分泌神经营养因子、蛋白等多种活性物质,促进受损的神经元的存活及其轴突再生,参与周围神经系统中神经纤维的构成。在外周神经损伤后,SCs被激活去分化,参与去除髓鞘碎片,为轴突再生提供途径。移植的SCs已经显示出在动物实验中有促进神经再生的作用。然而,SCs的临床治疗效果往往受其来源的诸多限制,我们课题组先前的研究已经获得人胚胎干细胞源神经干细胞（human embryonic stem cell derived-neural stem cells,h ESC-NSCs）,理论上人神经干细胞源施万样细胞（...
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人胚胎干细胞来源的神经干细胞(hESC-NSCs)及人神经干细胞源施万样细胞(SC-likecells)
B，C）。RT-qPCR结果表明，与hESC-NSCs相比，神经干细胞标记物如NESTIN，SOX1，SOX2和PAX6在SC-like cells中的表达水平下降，其中NESTIN，SOX1，SOX2表达水平差异有统计学意义（图2.2 D）；几种神经胶质细胞标志物，包括MBP、P0、P75NTR、PMP-22、GFAP、HNK-1和S100β（图2.2 E），在SC-likecells中表达量均上调。 图2.2 F为SC-like cells的胶质细胞标志物普通PCR分析。图 2.2：SC-like cells胶质细胞标志物的细胞定位及基因表达A-C：SC-like cells的GFAP (A)、P75NTR(B)和S100β（C）细胞免疫荧光定位；D：hESC-NSCs
经干细胞源施万样细胞诱导分化及施万样细胞微囊泡对轴突再生作用ell MVs蛋白，放置-20℃以备用。白标准品及BCA工作液的配制g BCA 加入 0.4mL 蛋白标准配制液后取适量稀释 50 倍，即现剂 A：BCA 试剂 B=50：1 的比例配制适量 BCA 工作液。-like cell MVs 蛋白浓度的检测6 孔板中设置 8 孔蛋白标准品，浓度依次为 0、0.025、0.05、0.5 mg/mL（总体积 20 μL）；另加 20 μL 稀释一定倍数的待测品孔中后，上述各孔加入 200μLBCA 工作液，37℃孵育 30 测定各孔 540 nm 波长下吸光度，绘制标准曲线，并计算待测如图 3.1 所示：
【参考文献】：
期刊论文
[1]Macrophage depletion and Schwann cell transplantation reduce cyst size after rat contusive spinal cord injury[J]. Yee-Shuan Lee,Lucy H.Funk,Jae K.Lee,Mary Bartlett Bunge. Neural Regeneration Research. 2018(04)
[2]糖原检测方法研究进展[J]. 杨柳,郭海云,邵长健,朱凯龙,张伟东,才延辉,李燕. 现代生物医学进展. 2018(01)
[3]Schwann cell development,maturation and regeneration:a focus on classic and emerging intracellular signaling pathways[J]. Luca Franco Castelnovo,Veronica Bonalume,Simona Melfi,Marinella Ballabio,Deborah Colleoni,Valerio Magnaghi. Neural Regeneration Research. 2017(07)
[4]大鼠背根神经节神经元原代培养中纯化方法的改良[J]. 李晓丽,张石波,孙晓婷,易剑锋,郭可盈,高小东,李人杰,强亮,丁斐,施海燕. 南通大学学报(医学版). 2015(04)
[5]骨髓间充质干细胞修复坐骨神经损伤的研究进展[J]. 王长辉,李德华. 生物医学工程学杂志. 2010(05)
本文编号：3561116
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人胚胎干细胞来源的神经干细胞(hESC-NSCs)及人神经干细胞源施万样细胞(SC-likecells)
B，C）。RT-qPCR结果表明，与hESC-NSCs相比，神经干细胞标记物如NESTIN，SOX1，SOX2和PAX6在SC-like cells中的表达水平下降，其中NESTIN，SOX1，SOX2表达水平差异有统计学意义（图2.2 D）；几种神经胶质细胞标志物，包括MBP、P0、P75NTR、PMP-22、GFAP、HNK-1和S100β（图2.2 E），在SC-likecells中表达量均上调。 图2.2 F为SC-like cells的胶质细胞标志物普通PCR分析。图 2.2：SC-like cells胶质细胞标志物的细胞定位及基因表达A-C：SC-like cells的GFAP (A)、P75NTR(B)和S100β（C）细胞免疫荧光定位；D：hESC-NSCs
经干细胞源施万样细胞诱导分化及施万样细胞微囊泡对轴突再生作用ell MVs蛋白，放置-20℃以备用。白标准品及BCA工作液的配制g BCA 加入 0.4mL 蛋白标准配制液后取适量稀释 50 倍，即现剂 A：BCA 试剂 B=50：1 的比例配制适量 BCA 工作液。-like cell MVs 蛋白浓度的检测6 孔板中设置 8 孔蛋白标准品，浓度依次为 0、0.025、0.05、0.5 mg/mL（总体积 20 μL）；另加 20 μL 稀释一定倍数的待测品孔中后，上述各孔加入 200μLBCA 工作液，37℃孵育 30 测定各孔 540 nm 波长下吸光度，绘制标准曲线，并计算待测如图 3.1 所示：
【参考文献】：
期刊论文
[1]Macrophage depletion and Schwann cell transplantation reduce cyst size after rat contusive spinal cord injury[J]. Yee-Shuan Lee,Lucy H.Funk,Jae K.Lee,Mary Bartlett Bunge. Neural Regeneration Research. 2018(04)
[2]糖原检测方法研究进展[J]. 杨柳,郭海云,邵长健,朱凯龙,张伟东,才延辉,李燕. 现代生物医学进展. 2018(01)
[3]Schwann cell development,maturation and regeneration:a focus on classic and emerging intracellular signaling pathways[J]. Luca Franco Castelnovo,Veronica Bonalume,Simona Melfi,Marinella Ballabio,Deborah Colleoni,Valerio Magnaghi. Neural Regeneration Research. 2017(07)
[4]大鼠背根神经节神经元原代培养中纯化方法的改良[J]. 李晓丽,张石波,孙晓婷,易剑锋,郭可盈,高小东,李人杰,强亮,丁斐,施海燕. 南通大学学报(医学版). 2015(04)
[5]骨髓间充质干细胞修复坐骨神经损伤的研究进展[J]. 王长辉,李德华. 生物医学工程学杂志. 2010(05)
本文编号：3561116
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jichuyixue/3561116.html
教材专著
