miR-125b-5p促进分枝杆菌在宿主细胞和小鼠体内存活的研究

发布时间：2022-01-01 18:25

　　通过观察miR-125b-5p对分枝杆菌在宿主细胞和小鼠体内存活情况的影响,探究其在抗结核免疫过程中的作用。采用不同培养基对分枝杆菌进行培养并计数;以1640培养基加10%胎牛血清培养所有实验用细胞。将终浓度50 nmol/L的miR-125b-5p模拟物、miR-125b-5p抑制剂及磷酸盐缓冲液（PBS）对照加入细胞后,在不同时间点收集细胞。用分枝杆菌分别感染宿主细胞（A549、THP-1和RAW264.7）以及C57BL/6小鼠。采用定量聚合酶链反应检测miR-125b-5p的表达量。结果miR-125b-5p在分枝杆菌感染的多种宿主细胞及小鼠中都显著上调表达,其中小鼠肺部的表达量提高了约15倍。分别转染模拟物和抑制剂后,再用分枝杆菌感染细胞,结果发现miR-125b-5p可促进分枝杆菌在宿主细胞内的生长。当miR-125b-5p抑制剂注射到卡介苗（BCG）感染的小鼠体内时,小鼠体内的细菌载量显著降低（P<0.05）。本研究证明miR-125b-5p可调控分枝杆菌在宿主细胞及小鼠体内的生长,在抗结核免疫过程中发挥了重要作用。进一步对其作用机制的深入研究将为临床结核病的治疗提... 

【文章来源】：微生物与感染. 2020,15(02)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

图1 分枝杆菌感染不同类型的细胞诱导了细胞内miR-125b-5p的上调表达

用BCG感染吞噬细胞后,再转染miR-125b-5p抑制剂来减低细胞内miR-125b-5p的表达量。菌落计数的结果表明,在被抑制剂转染的A549细胞中,BCG菌落数目约是对照组的50%(图3B,左图)。同样,在被抑制剂转染的巨噬细胞THP-1和RAW264.7中,BCG的菌落数目都比对照组显著降低(图3B,中、右图)。结果说明,在转染miR-125b-5p抑制剂后,分枝杆菌在细胞内的生长数目减少。表明miR-125b-5p的表达能够促进分枝杆菌在细胞内的生长。图3 miR-125b-5p及其抑制剂对细胞内感染的BCG生长的影响

图2 miR-125b-5p在BCG感染的C57BL/6小鼠肺部的表达水平显著高于对照组2.3 miR-125b-5p抑制剂减低分枝杆菌感染小鼠体内的细菌载量

【参考文献】：
期刊论文
[1]中性粒细胞在抗结核免疫中的作用[J]. 熊坤龙,程训佳,张文宏,王菲菲.  微生物与感染. 2018(03)
[2]结核分枝杆菌感染相关microRNA的研究进展[J]. 王杰,刘春法,崔永勇,赵德明,周向梅.  畜牧与兽医. 2016(10)
[3]结核分枝杆菌与巨噬细胞相互作用的研究进展[J]. 王静娴,杨春.  微生物与感染. 2010(03)



本文编号：3562591