生殖支原体MgPa特异性结合多肽的筛

发布时间：2022-01-02 13:12

　　生殖支原体（Mycoplasma genitalium,Mg）是介于病毒与细菌之间、缺乏细胞壁、呈高度多型性,可在无生命培养基中繁殖的原核细胞型微生物,可引起泌尿生殖系统感染,被归类于性传播疾病病原体之一。近年来,Mg感染率呈现上升趋势,但目前仍然没有满足临床需要的药物和疫苗可供使用。Mg最关键的外膜粘附蛋白为生殖支原体粘附素蛋白（Mg Pa）,其C端具有较强的免疫原性,自发性的无细胞黏附活性的Mg突变株则缺乏Mg Pa,因此,Mg Pa在Mg的致病性方面起着至关重要的作用。本研究利用构建好的原核表达载体PET-30a（+）/Mg Pa在大肠杆菌中诱导表达Mg Pa的重组蛋白（r Mg Pa）,采用噬菌体展示随机肽库技术筛选Mg Pa重组蛋白的特异性结合多肽,并对筛选到的特异性多肽进行鉴定。本研究目的:1、利用课题组前期构建好的含生殖支原体粘附素蛋白（Mg Pa）优势表位（1 075¹ 364 aa）的重组载体,表达并纯化Mg Pa,为研究Mg Pa的生物学功能奠定前期实验基础。2、利用噬菌体展示随机肽库筛选并鉴定Mg Pa的特异性结合多肽,为研究Mg Pa的致病... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

IPTG不同诱导浓度对pET-30a(+)/MgPa表达的影响

同一 IPTG 诱导剂量 1.5mmol/L，不同诱进行条件摸索，进行 SDS-PAGE 分析（图 2.2）显示：表达量增多，而蛋白量达到高峰的诱导时间为 4h 时。M 1 2 3 4 5 6 7 8

图 2.3 诱导温度的不同对 pET-30a(+)/MgPa 表达的影响准品；1：37℃诱导 pET-30a(+)/MgPa 的沉淀；2：37℃诱导 pET-30a(+：30℃诱导 pET-30a(+)/MgPa 的沉淀；4：30℃诱导 pET-30a(+)/MgPa 的导 pET-30a(+)/MgPa 的沉淀；6：27℃诱导 pET-30a(+)/MgPa 的上清。

【参考文献】：
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本文编号：3564236