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基于核酸扩增信号放大技术的结核分枝杆菌检测新方法

发布时间:2022-02-21 14:44
  结核病(Tuberculosis,TB)是一种由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的传染性很强的流行性疾病,严重危害人类健康。现有的结核病临床诊断方法,如痰涂片镜检、细菌培养、X射线检查等,或因灵敏度低、或因耗时长、或因仪器昂贵而无法在结核病的早期诊断中得到应用。近年来,相关科研工作者积极开发基于核酸扩增技术(Nucleic Acid Amplification Technology,NAAT)的结核病快速诊断方法。这些方法检测速度快且灵敏度高,但需借助酶以及专业的技术人员和精密的实验设备来实现从而限制了NAAT在临床的应用。基于此,本文开发了两种新型的快速、简易、低成本的结核病诊断方法。该方法无需酶参与即可实现结核分枝杆菌特定基因序列的检测,具体内容如下:(1)构建基于链置换反应(Strand displacement amplification,SDA)和磁珠(Magnetic beads,MBs)的结核分枝杆菌检测方法。本文设计的用于MTB 16sDNA检测的SDA包括两个DNA发夹探针,分别为MBs修饰的识别探针(MBs-Hp1)和... 

【文章来源】:东华理工大学江西省

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
中英文缩略词表
第一章 绪论
    1.1 引言
    1.2 结核病简介
    1.3 结核病检测研究进展
        1.3.1 传统检测方法
        1.3.2 免疫学诊断
        1.3.3 分子生物学诊断
        1.3.4 构建生物传感平台
    1.4 磁珠的介绍与应用
    1.5 本文的研究意义、创新点及研究内容
第二章 基于SDA和MBs的结核分枝杆菌检测
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验试剂及核苷酸序列
        2.2.2 仪器设备
        2.2.3 实验方法
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 不同实验条件的影响
        2.3.2 基于SDA和MBs荧光传感器检测MTB
        2.3.3 选择性分析
        2.3.4 PCR样品检测
        2.3.5 MBs-Hp1探针的循环使用
    2.4 结论
第三章 基于HCR和MBs的结核分枝杆菌检测
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验试剂及核苷酸序列
        3.2.2 仪器设备
        3.2.3 实验方法
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 条件优化
        3.3.2 基于MBs和HCR荧光传感器检测MTB
        3.3.3 选择性分析
        3.3.4 PCR样品检测
        3.3.5 MBs-H1探针的循环利用
    3.4 结论
第四章 结论
参考文献
已发表论文
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]药物治疗耐异烟肼和利福平结核病的不良反应观察[J]. 喻革玲.  中国处方药. 2017(11)
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[3]耐药结核分枝杆菌的检测方法与进展[J]. 俞春松.  中国高等医学教育. 2017(05)
[4]荧光定量PCR在脑脊液结核分枝杆菌DNA检测中的应用[J]. 王俊妨,靳颖,牛伟霞,刘锦.  检验医学. 2017(02)
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[10]γ干扰素释放试验诊断艾滋病患者潜伏结核感染的Meta分析[J]. 康振,时春虎,田金徽,杨克虎.  循证医学. 2010(06)

硕士论文
[1]牛结核病皮内变态反应检测抗原的筛选及应用研究[D]. 石慧.吉林农业大学 2016
[2]基于直立碳纳米管电极和瓜环主客体识别作用的电化学生物传感器研究[D]. 王霞.华东师范大学 2012
[3]基于纳米技术和替代机理构建的电化学生物传感器的研究[D]. 邢蓉.华东师范大学 2010



本文编号:3637472

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