高盐对乳鼠心脏成纤维细胞增殖与胶原分泌的影响及相关机制

发布时间：2022-04-23 17:13

　　目的观察高盐对乳鼠心脏成纤维细胞（CFs）增殖及胶原分泌的影响,并分析其可能的相关机制。方法胰酶、Ⅱ型胶原酶两步消化法消化分离乳鼠心肌组织,通过差速贴壁法收集、培养乳鼠CFs。CFs传至第4代去血清同步化24 h,分为对照组（培养基Na⁺终浓度139 mmol/L）、高盐组（培养基Na⁺终浓度146、149、152、155、158、161、164、167、170、173和176 mmol/L）,培养24、48、72和96 h后,CCK-8检测CFs增殖情况。选择增殖作用最为明显的Na⁺浓度和作用时间,以Na⁺ 139 mmol/L为对照进行后续实验,高盐组（培养基Na⁺终浓度161 mmol/L）,甘露醇组（甘露醇浓度为29.334 mg/ml）,其中甘露醇组与高盐组渗透压相同。CCK-8检测渗透压对CFs增殖的影响。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测CFs培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达。Western印迹检测CFs中转化生长因子（TGF）-β1、p-smad3及smad7蛋... 

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 实验动物伦理
    1.3 乳鼠CFs的培养及鉴定
    1.4 CCK-8测高盐对乳鼠CFs增殖的影响并筛选促CFs增殖的最佳Na+浓度和作用时间
    1.5 CCK-8增殖试剂盒检测渗透压对乳鼠CFs增殖的影响
    1.6 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测高盐对乳鼠CFs中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响
    1.7 Western印迹检测高盐对乳鼠CFs中TGF-β1、p-smad3、smad7蛋白表达的影响
    1.8 统计学分析
2 结 果
    2.1 乳鼠CFs的生长形态及鉴定
    2.2 高盐诱导乳鼠CFs增殖的时效量效关系及促CFs增殖的最佳Na+浓度和作用时间
    2.3 渗透压对乳鼠CFs增殖的影响
    2.4 高盐对大鼠CFs Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原分泌的影响
    2.5 高盐对大鼠CFs 中TGF-β1、p-smad3、smad7蛋白表达的影响
3 讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]高盐诱导Wistar大鼠肾损害的机制及替米沙坦的干预效果[J]. 王晓春,商黔惠,石耿辉.  中国老年学杂志. 2015(12)
[2]乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞体外分离培养方法的优化[J]. 朱晓丽,王丽,马依彤,杨毅宁,陈邦党,马苗苗.  中国动脉硬化杂志. 2015(01)
[3]替米沙坦对高盐饮食诱导大鼠心肌重构的影响[J]. 石耿辉,商黔惠,吴芹,王晓春.  中华高血压杂志. 2013(08)
[4]转化生长因子β1/Smads表达在高盐饮食致Wistar大鼠心肌纤维化中的作用及替米沙坦干预[J]. 李同,商黔惠,刘婵,石耿辉.  中华高血压杂志. 2013(07)
[5]长期高盐饮食对Wistar大鼠血压和肾脏的影响及替米沙坦干预研究[J]. 王晓春,商黔惠,祝荣文,吴芹.  中华高血压杂志. 2013(03)
[6]TGF-β1/Smads和ERK表达异常在高盐饮食诱导的大鼠血管重构中的作用[J]. 刘婵,商黔惠,闵晓强,陈剑玲,毛万姮.  中国病理生理杂志. 2012(10)
[7]TGF-β/Smads信号通路在心肌纤维化发生和治疗中应用前景的研究进展[J]. 陈蓉,谢梅林.  中国药理学通报. 2012(09)



本文编号：3647625