适配体捕获磁珠富集大肠埃希菌O157:H7方法的建立
发布时间:2022-07-16 19:37
目的建立一种低浓度大体积样品中快速捕获富集大肠埃希菌O157:H7的方法。方法利用链霉亲和素-生物素结合特性,将生物素标记大肠埃希菌O157:H7特异性适配体与链霉亲和素磁珠相结合,制备捕获磁珠,捕获样品中的大肠埃希菌O157:H7,通过平板培养计数法检测捕获效率。结果通过优化反应条件,建立的适配体捕获磁珠富集法在O157:H7低浓度样品(10~3cfu/ml)中捕获效率≥92.49%,大肠埃希菌O157:H7浓度10~1cfu/ml时捕获效率为96.08%,高浓度样品(10~7cfu/ml)中捕获效率≥56.52%,在模拟实际样品(牛奶、果汁、汽水)中捕获效率均≥70%,与PCR法结果一致。结论基于免疫磁珠技术建立的大肠埃希菌快速捕获富集方法,具有特异性强、灵敏度高操作简单、成本低廉等特点,在实际检测中具有良好发展前景。
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
材料与方法
1 材料
1.1 菌株
1.2 主要试剂
2 方法
2.1 细菌培养
2.2 捕获磁珠的制备
2.3 适配体偶联浓度的确定
2.4 捕获磁珠与大肠埃希菌O157:
2.5 捕获磁珠对不同浓度大肠埃希菌O157:H7的捕获效率
2.6 捕获磁珠对模拟样品中大肠埃希菌O157:H7的检测
结果
1最佳捕获磁珠适配体浓度
2大肠埃希菌O157:H7同捕获磁珠最佳孵育时间
3 捕获磁珠对大肠埃希菌O157:H7的敏感性
4 模拟样品检测
讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]基于表面增强拉曼光谱法快速检测细菌抗生素敏感性的研究[J]. 付世杰,李磊娇,聂鑫,王习文,李志萍,曲晗,王宇田,李颂,田栢会,郝良玉,王玥,邵琳,卜思含,韩德明. 中国病原生物学杂志. 2018(12)
[2]核酸适配体在食源性致病菌检测中应用的研究进展[J]. 胡金强,黄润娜,王一,赵卫东,高辉,姜春鹏,耿尧,景建洲,董彩文,王章存. 食品工业科技. 2019(09)
[3]基于荧光微球的免疫层析法结合免疫磁珠分离技术快速定量检测鼠伤寒沙门氏菌[J]. 李倩茹,胡霏,杨悦熙,刘晓云,何小维. 现代食品科技. 2018(03)
[4]基于免疫磁球的埃博拉病毒糖蛋白高灵敏比色检测[J]. 熊俊逸,胡姣,夏骊,庞代文,张志凌. 分析科学学报. 2017(05)
[5]基于全菌消减SELEX技术的体外筛选大肠埃希菌O157:H7适配体研究[J]. 许蕊,邱志刚,杨栋,金敏,刘伟丽,李君文,徐群英,袁兆康,谌志强. 环境与健康杂志. 2016(01)
[6]免疫磁珠富集鼠伤寒沙门氏菌条件的研究[J]. 朱海华,王永,王法云,周莉,王慧,邱红玲,平洋,谭静. 食品科技. 2015(08)
[7]免疫磁球捕获-PCR检测牛奶中金黄色葡萄球菌的研究[J]. 邓奕,许迪莘,赵琳娜,杨寅. 食品工业科技. 2015(07)
[8]免疫磁珠法富集沙门氏菌的优化及应用[J]. 山珊,牛瑞江,赖卫华,刘道峰,魏华,熊勇华. 食品工业科技. 2013(13)
本文编号:3663156
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
材料与方法
1 材料
1.1 菌株
1.2 主要试剂
2 方法
2.1 细菌培养
2.2 捕获磁珠的制备
2.3 适配体偶联浓度的确定
2.4 捕获磁珠与大肠埃希菌O157:
2.5 捕获磁珠对不同浓度大肠埃希菌O157:H7的捕获效率
2.6 捕获磁珠对模拟样品中大肠埃希菌O157:H7的检测
结果
1最佳捕获磁珠适配体浓度
2大肠埃希菌O157:H7同捕获磁珠最佳孵育时间
3 捕获磁珠对大肠埃希菌O157:H7的敏感性
4 模拟样品检测
讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]基于表面增强拉曼光谱法快速检测细菌抗生素敏感性的研究[J]. 付世杰,李磊娇,聂鑫,王习文,李志萍,曲晗,王宇田,李颂,田栢会,郝良玉,王玥,邵琳,卜思含,韩德明. 中国病原生物学杂志. 2018(12)
[2]核酸适配体在食源性致病菌检测中应用的研究进展[J]. 胡金强,黄润娜,王一,赵卫东,高辉,姜春鹏,耿尧,景建洲,董彩文,王章存. 食品工业科技. 2019(09)
[3]基于荧光微球的免疫层析法结合免疫磁珠分离技术快速定量检测鼠伤寒沙门氏菌[J]. 李倩茹,胡霏,杨悦熙,刘晓云,何小维. 现代食品科技. 2018(03)
[4]基于免疫磁球的埃博拉病毒糖蛋白高灵敏比色检测[J]. 熊俊逸,胡姣,夏骊,庞代文,张志凌. 分析科学学报. 2017(05)
[5]基于全菌消减SELEX技术的体外筛选大肠埃希菌O157:H7适配体研究[J]. 许蕊,邱志刚,杨栋,金敏,刘伟丽,李君文,徐群英,袁兆康,谌志强. 环境与健康杂志. 2016(01)
[6]免疫磁珠富集鼠伤寒沙门氏菌条件的研究[J]. 朱海华,王永,王法云,周莉,王慧,邱红玲,平洋,谭静. 食品科技. 2015(08)
[7]免疫磁球捕获-PCR检测牛奶中金黄色葡萄球菌的研究[J]. 邓奕,许迪莘,赵琳娜,杨寅. 食品工业科技. 2015(07)
[8]免疫磁珠法富集沙门氏菌的优化及应用[J]. 山珊,牛瑞江,赖卫华,刘道峰,魏华,熊勇华. 食品工业科技. 2013(13)
本文编号:3663156
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