碱性成纤维细胞生长因子及胰岛素样生长因子1对精原干细胞增殖凋亡影响的机制

发布时间：2022-08-23 20:40

　　背景:生长因子作为体外细胞培养和体内细胞生长及增殖必需的调节因子,一直被广泛的关注。目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）与胰岛素样生长因子1（insulin-like growth facter,IGF-1）联合作用对小鼠精原干细胞增殖、凋亡的影响。方法:从6-8d龄昆明雄性小鼠睾丸内分离培养精原干细胞并进行鉴定。将精原干细胞接种于经丝裂霉素C处理过的胚胎成纤维细胞饲养层上,分组干预:对照组加入正常DMEM培养基进行培养;b FGF、IGF-1组分别加入含20μg/L bFGF、20μg/L IGF-1的DMEM培养基进行培养;b FGF+IGF-1组同时加入含20μg/L b FGF及20μg/L IGF-1的DMEM培养基进行培养。采用CCK-8、EDU染色法分别检测精原干细胞增殖活性,流式细胞仪检测精原干细胞生长周期和细胞凋亡情况,Western blot检测增殖和凋亡相关蛋白PCNA、Bax、Bcl-2的表达。结果与结论:①与对照组比较,b FGF组、IGF-1组、b FGF+IGF-1组吸光度值显著升高,与... 

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文题释义：
缩略语：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
        1.3.1 实验动物
        1.3.2 实验细胞
        1.3.3 实验试剂与仪器
    1.4 方法
        1.4.1 胚胎成纤维细胞饲养层的准备
        1.4.2 精原干细胞得分离、培养与鉴定
        1.4.3 实验分组
        1.4.4 CCK-8检测细胞增殖
        1.4.5 EDU免疫荧光分析法检测细胞增殖
        1.4.6 流式细胞仪检测细胞周期
        1.4.7 流式细胞仪检测细胞凋亡
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果Results
    2.1 精原干细胞的形态和鉴定
    2.2 CCK-8法检测细胞增殖
    2.3 EDU检测细胞增殖情况
    2.4 流式细胞术检测细胞周期
    2.5 流式细胞术检测细胞凋亡情况
3 讨论Discussion


【参考文献】：
期刊论文
[1]EdU掺入法研究炎症状态下小鼠骨髓粒系的增殖[J]. 任仟,张潇予,郭荣霞,谢忻琰,张苏东,谢雪梅,范玉萍,王永荣,张存玲,王彤,刘飞,刘鹏,许元富,罗鸿博.  中华微生物学和免疫学杂志. 2018 (04)
[2]灵长类动物精原干细胞的研究进展[J]. 范翠花,兰风华,陈杭,张朵.  中华男科学杂志. 2016(04)
[3]Bcl-2基因的研究进展[J]. 付倩梅,李晓明.  西南军医. 2014(01)
[4]促生长因子对小鼠精原干细胞体外增殖作用的研究[J]. 凡志国,胡建宏,索丽娟,李青旺,江中良,吕瑞凯,刘玉,莫金鑫,强者.  黑龙江畜牧兽医. 2011(09)
[5]生长因子对人精原干细胞体外存活和增殖的影响[J]. 郭雪华,蔺勇,王晔玲,郑连文.  中华男科学杂志. 2008(10)
[6]bcl-2/bax基因调控机体细胞凋亡的机制研究进展[J]. 王彤,刘存志,刘玉珍,于建春,韩景献.  中国老年学杂志. 2008(16)
[7]增殖细胞核抗原（PCNA）的分子结构及其生物学功能研究进展[J]. 宋楠萌,桑建利,徐恒.  自然科学进展. 2006(10)
[8]体外培养条件下SCF、LIF与bFGF对昆明白小鼠精原干细胞增殖的影响[J]. 尹明,李德雪.  生物工程学报. 2002(06)



本文编号：3678443