多糖蛋白结合疫苗中残留ADH和EDAC同时定量检测的液相色谱串联质谱法的建立

发布时间：2022-10-11 18:30

　　目的建立同时定量检测己二酰肼（adipic acid dihydrazide,ADH）和N-（3-二甲基氨基丙基）-N′-乙基碳二亚胺[N-（3-dimethylaminopropyl）-N′-ethylcarbodimide,EDAC]的液相色谱串联质谱（liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）法,实现多糖蛋白结合物（肺炎球菌结合物、脑膜炎球菌结合物和b型流感嗜血杆菌结合物）中残留ADH和EDAC的定量研究。方法通过检测EDAC在纯水、中性水溶液[（50 mmol/L磷酸缓冲溶液（pH 6.8）、200 mmol/L氯化钠水溶液和疫苗培养基）]及0.1%甲酸（formic acid,FA）水溶液中的稳定性,确定实现EDAC完全转换为EDU的前处理条件。优化了色谱柱种类对ADH、EDU和EDAC的保留,以及质谱条件如产物离子、碰撞电压、Q1和Q3电压等对ADH和EDU定量灵敏度的影响,建立以C18WCX（2.1 mm×150 mm,5μm）为固定相,pH 2～3的0.1%FA-水和0.1%FA-乙腈为流动相的LC-... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 样品及标准品
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 色谱条件优化
    1.4 质谱条件优化
    1.5 ADH及EDAC稳定性试验
    1.6 方法验证
        1.6.1 检出限及定量限
        1.6.2线性
        1.6.3 精密度
        1.6.4 准确度
2 结果
    2.1 色谱条件
    2.2 质谱条件
    2.3 ADH及EDAC的稳定性
    2.4 方法验证
        2.4.1 LOD及LOQ
        2.4.2 线性
        2.4.3 精密度
        2.4.4 准确度
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]液相色谱-串联质谱法测定百日咳和百白破疫苗中百日咳杆菌气管细胞毒素[J]. 龙珍,卫辰,郭志谋,马霄,李月琪,姚劲挺,冀峰,李长坤,黄涛宏.  色谱. 2019(02)
[2]不同蛋白载体制备A、C、Y、W135群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗的免疫原性[J]. 佟巍,孙晓东,刘建斌,尹珊珊,刘建凯.  中国生物制品学杂志. 2018(02)
[3]高选择性高效液相色谱-电化学检测法测定丹参中5种酚类物质（英文）[J]. 龙珍,GAMACHE Paul,郭志谋,潘媛媛,张艳海,刘晓达,金燕,刘绿叶,梁立娜,李仁勇.  色谱. 2017(08)
[4]多糖-蛋白结合疫苗的结合化学与检测方法[J]. 王玺,沈荣.  中国生物制品学杂志. 2008(10)
[5]细菌多糖-蛋白结合疫苗研究进展[J]. 张娜,张萍,肖詹蓉.  国际生物制品学杂志. 2011 (05)



本文编号：3691074