刺槐素对金黄色葡萄球菌Sortase A的抑制作用与机制研究

发布时间：2017-05-20 07:52

  本文关键词：刺槐素对金黄色葡萄球菌Sortase A的抑制作用与机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,金葡菌)是一种可以导致多种感染的重要医学病原菌,其可以对常用的抗生素药物产生耐药性。耐抗生素金葡菌的出现严重威胁人类健康,因此迫切需要一种不会产生选择压力的治疗方法。应对细菌耐药性的一种有效方法是发展抗毒力策略,干扰细菌关键的毒力因子或毒力调节途径。金葡菌Sortase A(Srt A)是第一种被深入研究的分选酶,它在细菌致病过程中必不可少,以其作为潜在靶标的新治疗方法正备受关注。Srt A负责将多种与细菌毒力相关的表面蛋白锚定到细胞壁。因此,抑制Srt A活性可以有效降低金葡菌的毒力。本研究采用荧光共振能量转移(FRET)方法筛选不抑菌的Srt A抑制剂,选取抑制效果较好的刺槐素作为研究主体,进一步探索其对金葡菌Srt A活性的抑制作用以及对金葡菌感染小鼠的保护和治疗作用。实验通过绘制刺槐素作用下金葡菌生长曲线,明确刺槐素不会影响金葡菌生长;利用蛋白结合实验和测定金葡菌细胞壁Sp A含量,验证刺槐素可以抑制Srt A活性,影响金葡菌黏附纤维蛋白原,影响金葡菌Sp A锚定细胞壁;通过分子对接和分子动力学模拟,探讨刺槐素与Srt A的作用机制,发现刺槐素以一个紧凑的构象结合在Srt A活性口袋中,其与Srt A作用的关键结合位点是Arg-139和Lys-140;构建了金葡菌感染小鼠肾脓肿模型,评价刺槐素对金葡菌感染小鼠的保护和治疗作用,结果表明刺槐素通过抑制Srt A活性,降低金葡菌毒力,提高金葡菌感染小鼠的生存率,降低金葡菌感染小鼠肾脓肿模型中肾脏脓肿程度。综上刺槐素有潜力成为通过抑制Srt A活性治疗金葡菌感染的先导化合物,其为设计和研发新药提供了重要结构基础。
【关键词】：金黄色葡萄球菌 Sortase A 刺槐素 肾脓肿
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R378
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-10
• 前言10-11
• 第一篇 文献综述11-29
• 第一章 金黄色葡萄球菌研究进展11-18
• 1.1 金葡菌的疾病负担11-12
• 1.2 金葡菌的发病机制12-13
• 1.3 金葡菌的细胞壁结合蛋白13-16
• 1.4 从抗生素到抗毒力治疗16-18
• 第二章 Sortase A的研究进展18-23
• 2.1 Sortase家族简介18-19
• 2.2 SrtA的结构19-22
• 2.3 SrtA的功能机制22-23
• 第三章 Sortase A抑制剂的最新进展和未来展望23-29
• 3.1 SrtA和细菌毒力24
• 3.2 SrtA抑制剂24-26
• 3.3 SrtA抑制剂的未来展望26-29
• 第二篇 研究内容29-57
• 第一章 金黄色葡萄球菌SrtA抑制剂的筛选29-41
• 1 材料与方法30-35
• 2 结果35-39
• 3 讨论39-40
• 4 小结40-41
• 第二章 刺槐素抑制SrtA活性的研究41-52
• 1 材料与方法41-45
• 2 结果45-49
• 3 讨论49-51
• 4 小结51-52
• 第三章 刺槐素对金葡菌引起的小鼠肾脓肿的治疗作用52-57
• 1 材料与方法52-54
• 2 结果54-55
• 3 讨论55-56
• 4 小结56-57
• 结论57-58
• 参考文献58-69
• 导师简介69-70
• 作者简介70-71
• 攻读学位期间发表的学术论文71-72
• 致谢72

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本文编号：380970