CRMP2真核表达质粒在大鼠缺血/再灌注脑皮质转染效率的对比研究

发布时间：2023-05-19 04:20

　　目的:筛选Collapsin反应调节蛋白2(CRMP2)真核表达质粒转染大鼠脑皮质的适宜注射部位。方法:成年雄性SD大鼠150只随机分为空白质粒(VP)组、侧脑室(LV)组、海马(H)组、皮质(C)组及嗅球(OB)组。选定质粒注射部位后,20只大鼠随机分为假手术(sham)组、缺血再灌注(MCAO)组、缺血再灌注+空白质粒(MCAO+GFP)组、缺血再灌注+CRMP2真核质粒干预(MCAO+CRMP2/GFP)组。大鼠脑缺血/再灌注模型成功后,分别于相应4个部位立体定向注射CRMP2真核表达质粒/空白质粒,转染后24 h和48 h,采用Western blot及RT-PCR检测缺血区皮质CRMP2蛋白及m RNA的表达;激光共聚焦检测GFP的表达。TTC检测脑梗死体积,同时行神经功能评估。结果:不同部位注射CRMP2真核表达质粒后,皮质CRMP2的表达均有增高,其中LV组及H组的转染效率明显高于C组及OB组(P<0.05),LV组与H组之间差异无统计学意义(P>0.05)。与MCAO及(MCAO+GFP)组相比,CRMP2真核质粒干预之后能缩小脑梗死体积,促进神经功能恢复(...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2主要试剂与仪器
    1.2 方法
        1.2.1 动物分组
        1.2.2 大鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型制备
        1.2.3 脑立体定位注射
        1.2.4 激光共聚焦检测GFP
        1.2.5 Western blot检测
        1.2.6 RT-PCR检测
        1.2.7 脑梗死体积检测及神经功能评估
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 质粒转染效率的观察
        2.1.1 不同部位注射空白质粒之后CRMP2的表达
        2.1.2 CRMP2真核表达质粒转染后脑组织中GFP的表达
        2.1.3 缺血侧皮质CRMP2的表达对比
    2.2 过表达CRMP2对大鼠脑缺血再灌注后保护作用的观察
3 讨论



本文编号：3819644