MAPK/ERK信号通路在少突胶质细胞形成与髓鞘再生中的作用

发布时间：2023-06-04 19:53

　　髓鞘(Myelin sheath)是包裹在神经轴突外的一层电绝缘膜,它在神经系统的电冲动传导中发挥了十分重要的作用,并为神经元提供营养及代谢支持。少突胶质细胞(Oligodendrocytes,OLs)由少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)分化而来,是中枢神经系统的髓鞘形成细胞。由髓鞘的损伤、脱失所引起疾病被统称为脱髓鞘疾病。常见的脱髓鞘疾病有视神经脊髓炎(neuromyelitis optica,NMO)、急性播散性脑脊髓炎(acute disseminated encephalomyelitis,ADEM)以及多发性硬化症(Multiple sclerosis,MS)等。脱髓鞘疾病现有药物均靶向免疫系统,只能在一定程度上延缓疾病的进程,不能治愈已有的损伤。在髓鞘损伤部位,髓鞘的再生修复常常不能正常进行。髓鞘再生受阻主要是由于脱髓鞘区域,数目丰富的少突胶质细胞前体细胞不能分化成成熟的OL。因此,近年来越来越多的研究致力于寻找能够促进OPC分化与髓鞘再生的小分子化合物,或者是能够干预上述过程的信号通路与药物靶点。基于上述目的,...

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 髓鞘概述
    1.2 少突胶质细胞的发育
    1.3 脱髓鞘疾病及其现有治疗方式
        1.3.1 视神经脊髓炎
        1.3.2 急性播散性脑脊髓炎
        1.3.3 多发性硬化症
    1.4 脱髓鞘疾病与髓鞘再生研究进展
        1.4.1 髓鞘再生研究动物模型
        1.4.2 调控少突胶质细胞发育的信号通路在髓鞘再生中的研究
        1.4.3 基于化合物筛选的促髓鞘再生药物及调控靶点的发现
    1.5 本论文的研究目标
第2章 实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞
        2.1.2 实验动物
        2.1.3 试剂与试剂盒
        2.1.4 仪器与耗材
        2.1.5 细胞培养液
        2.1.6 常规试剂配制
        2.1.7 化合物及酶液配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 原代NPC的分离与培养
        2.2.2 OPC体外分化体系的建立
        2.2.3 DRG神经元的分离与培养
        2.2.4 NG2+原代OPC分离与分化
        2.2.5 OPC-DRG 神经元体外共培养体系
        2.2.6 EAE模型
        2.2.7 Cuprizone诱导的小鼠脱髓鞘模型
        2.2.8 小鼠大脑与脊髓石蜡切片制备
        2.2.9 小鼠大脑与脊髓冰冻切片制备
        2.2.10 冰冻切片免疫荧光染色
        2.2.11 石蜡切片快蓝染色
        2.2.12 蛋白免疫印记
        2.2.13 qPCR检测基因表达变化
        2.2.14 脊髓与脑组织电镜样品制备(固定、脱水与包埋)
        2.2.15 细胞免疫荧光染色
        2.2.16 脾脏、外周血免疫细胞分离
        2.2.17 免疫细胞染色
        2.2.18 数据统计
第3章 实验结果
    3.1 少突胶质细胞分化体系的建立
    3.2 基于少突胶质细胞分化体系的化合物筛选
    3.3 PD0325901促进少突胶质细胞分化
    3.4 PD0325901 通过抑制 MAPK/ERK 信号通路促进少突胶质细胞分化
    3.5 PD0325901促进原代OPC分化
    3.6 PD0325901 促进 OPC-DRGN 共培养体系中髓鞘的形成
    3.7 PD0325901可能通过增强髓鞘再生缓解EAE
    3.8 PD0325901 促进 Cuprizone 模型小鼠髓鞘再生
    3.9 MAPK/ERK 在髓鞘再生中的作用总结
第4章 总结与讨论
    4.1 MAPK/ERK 与髓鞘再生修复
    4.2 免疫系统在髓鞘再生中的作用
    4.3 细胞移植在髓鞘再生中的研究
    4.4 新的研究方法在髓鞘再生研究中的应用
参考文献
附录 缩略语表
致谢
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果



本文编号：3830906