IP 3 R在LH-EGFR诱导小鼠卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用

发布时间：2023-10-03 22:35

　　目的:探究1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP₃R)在促黄体素-表皮生长因子受体(LH-EGFR)信号诱导卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用及机制。方法:构建小鼠卵丘-卵母细胞复合物(COCs)体外培养模型以及卵泡培养模型,研究IP₃R特异性抑制剂2-氨乙基二苯基硼酸脂(2-APB)及heparin对LH/EGF诱导减数分裂恢复以及EGF诱导卵丘扩展的影响,利用real-time PCR技术检测卵丘扩展因子的表达,钙离子荧光探针Fluo 3-AM检测胞内钙离子水平变化,酶联免疫法检测胞内cGMP水平变化。结果:IP₃R抑制剂2-APB和heparin能够有效抑制EGF诱导的减数分裂恢复(P<0.05),同时显著降低了COCs内cGMP的含量(P<0.05);2-APB和Heparin还能够抑制EGF诱导的卵丘扩展,同时显著降低卵丘扩展因子的mRNA表达水平(P<0.05);激活IP₃R可升高细胞内钙离子水平,而2-APB及heparin能够有效降低EGF升高的卵丘细胞内钙离子水平(P&...

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【文章目录】：
材 料 和 方 法
    1 实验动物
    2 实验试剂与仪器
    3 实验方法
        3.1 COCs的分离及培养
        3.2 卵泡的分离及培养
        3.3 卵丘扩展
        3.4 RNA的提取
        3.5 real-time PCR
        3.6 细胞内钙离子水平检测
        3.7 cGMP水平检测
    4 统计学处理
结 果
    1 IP3R抑制剂2-APB和heparin抑制EGF诱导的卵母细胞减数分裂恢复
    2 IP3R抑制剂2-APB和heparin抑制EGF诱导的卵丘扩展
    3 IP3R抑制剂2-APB和heparin抑制EGF诱导的卵丘细胞内钙离子水平升高
    4 IP3R抑制剂2-APB和heparin对COCs中cGMP水平的影响
    5 IP3R抑制剂2-APB和heparin抑制LH诱导的卵母细胞减数分裂恢复
讨 论



本文编号：3850781