鼠疫耶尔森菌caf1基因缺失株体外生物学特性和对小鼠致病性分析

发布时间：2023-12-22 08:00

　　目的探索caf1基因缺失对鼠疫耶尔森菌体外生物学特性与对小鼠致病性的影响。方法利用CRISPR/Cas12a介导的基因编辑技术构建鼠疫耶尔森菌caf1基因缺失株,并通过PCR技术对caf1基因缺失验证。比较鼠疫耶尔森菌caf1基因缺失株和野生株201在生长速率、液体培养状态、聚集情况等体外生物学特性和对小鼠致病性等方面的差异。结果 PCR扩增结果证实,caf1基因缺失株构建成功。体外生物学特征分析表明,与野生株相比,caf1基因缺失株的形态学和生长速率并未发生明显变化,自凝聚率升高。肺递送途径LD₅₀分析表明,caf1的缺失导致鼠疫耶尔森菌气溶胶感染小鼠半数致死剂量显著降低。结论不同途径感染结果表明,caf1基因缺失株相较于野生株,在肺递送、滴鼻、皮下、尾静脉注射4种途径下对BALB/c小鼠的毒力均降低。caf1基因的缺失导致鼠疫耶尔森菌自凝聚率升高,对BALB/c小鼠致病性下降。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材 料
        1.1.1 菌株、质粒及实验动物
        1.1.2 试剂
        1.1.3 仪器
    1.2 方 法
        1.2.1 caf1基因缺失株的构建
        1.2.2 caf1基因缺失株的鉴定
        1.2.3 细菌培养
        1.2.4 菌落形态观察
        1.2.5 生长曲线测定
        1.2.6 菌株自凝聚率测定
        1.2.7 气溶胶肺递送途径感染小鼠LD50测定
        1.2.8 不同途径感染小鼠生存曲线观察
        1.2.9 统计学分析
2 结 果
    2.1 caf1基因缺失株的鉴定
    2.2 菌落形态观察
    2.3 菌株生长曲线分析
    2.4 菌株自凝聚率比较
    2.5 气溶胶肺递送途径感染小鼠LD50比较
    2.6 不同途径小鼠感染试验
3 讨 论



本文编号：3874077