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白喉毒素无毒突变体CRM197蛋白的结构确证分析

发布时间:2024-01-29 20:03
  目的对本公司制备的白喉毒素无毒突变体CRM197蛋白进行结构确证分析。方法通过发酵、提纯制备3批CRM197蛋白,经N-末端序列、C-末端序列、质量肽图和肽段覆盖率分析进行一级氨基酸序列结构确证分析,经圆二色谱法进行二级蛋白结构确证分析。结果 3批CRM197蛋白N-末端均为GADDVVDSSK,C-末端均为FEIKS,质量肽图的紫外图谱高度一致,肽段覆盖率为100%,一级结构与标准CRM197蛋白氨基酸序列完全一致。3批CRM197蛋白二级结构测算值比例差异不大,批间稳定。结论本公司自制的3批CRM197蛋白与标准CRM197蛋白结构基本一致,为研制以CRM197为载体蛋白的多糖-蛋白结合疫苗及其产业化生产奠定了基础。

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图1CRM20170402(A)、CRM20170503(B)和CRM20170504批(C)CRM197蛋白质量肽图3~30min紫外图谱标注图对比

图1CRM20170402(A)、CRM20170503(B)和CRM20170504批(C)CRM197蛋白质量肽图3~30min紫外图谱标注图对比


图2CRM20170402(A)、CRM20170503(B)和CRM20170504批(C)CRM197蛋白质量肽图30~60min紫外图谱标注图对比

图2CRM20170402(A)、CRM20170503(B)和CRM20170504批(C)CRM197蛋白质量肽图30~60min紫外图谱标注图对比



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