MEKK2/3调控Hedgehog信号通路的机制与功能研究

发布时间：2024-03-05 02:32

　　MEKK2/3 是由 MAP3K(mitogen-activated protein kinase kinase kinase)家族的Map3k2/3基因所编码的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。MEKK2的激酶活性结构域氨基酸序列和MEKK3的激酶活性结构域氨基酸序列具有93%的相似性,因而在很多文献报道中被作为共同的研究对象。作为MAPK酶联反应的第一级关键激酶,MEKK2/3的激活受到外界信号分子和环境压力等的调控,其中信号分子包括FGF2(fibroblast growth factor 2)、EGF(epidermal growth factor)等生长因子和TNFα(tumor necrosis factor α)、IL-1β(interleukin-1 β)等炎症细胞因子;环境压力包括渗透压、紫外线照射、热击等。Hedgehog信号通路调控细胞的增殖、分化和组织器官发育等过程,在胚胎发育中起着关键性的作用。在成体组织中,Hedgehog信号通路在干细胞分化、组织损伤修复、肿瘤的发生发展等方面也有着重要的功能。GLI1(glioma-associated oncogene 1)作为H...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．１哺乳动物中Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路示意图［３４］??

对ＧＬＩ家族蛋白的截短型突变研究后发现，ＧＬＩ１不同于ＧＬＩ２和ＧＬＩ３的关??键在于ＧＬ１１只含有羧基端（Ｃ－端）的转录激活结构域，而ＧＬＩ２和ＧＬＩ３不仅含??有羧基端的转录激活结构域还含有氨基端（Ｎ－端）的转录抑制结构域（图１．２），??因而ＧＬＩ?１以激活Ｈｅｄｇｅｈｏｇ....

图１．２ＧＬＩ家族蛋白结构示意图［３５１

?Ｔ?＞？ｆ?＾??Ｎｕｃｌｅｕｓ?Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ?Ｎｕｃ（？ｔｕ??图１．１哺乳动物中Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路示意图［３４］??１．１．２?ＧＬＩ转录因子家族成员及特点??在脊椎动物的Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路中，ＧＬＩ蛋白是主要的转录因子，根据蛋??白结构和靶基因的不同....

图３．１?ＭＥＫＪＣ２／３通过其激酶活性抑制ＧＬＩ１的转录功能

荧光素酶报告系统，将ＭＥＫＫ３、ＭＥＫＫ３－ＫＤ分别与ＧＬＩ１、ＧＬＩ２、ＧＬＩ３共转于??ＨＥＫ２９３Ｔ细胞中，实验结果显示ＭＥＫＫ３大大降低了?ＧＬＩ１的荧光素酶活性，但??ＧＬＪ２和ＧＵ３的荧光素酶活性却不受影响（图３．１Ｆ）。以上所有实验充分证明了??ＭＥＫＫ２／３通过其....

图３．２ＭＥＫＫ２／３在斑马鱼体内抑制Ｈｅｄｇｅｈｏｇ信号通路

实验结果??竹ｃ／／／的ｍＲＮＡ表达，而ＭＥＫＫ３过表达的斑马鱼的ｍＲＮＡ在该区域则维??持在无法检测到的状态（图３．２Ａ）。将ＭｅＷ：２／３基因的在斑马鱼受精卵中敲除后，??得到Ｍ也ｔ２／３稳定双敲除的斑马鱼。对受精后４８?ｈｒ的野生型和双敲除斑??马鱼的ｃＤＮＡ进行ＲＴ－ｑＰ....

本文编号：3919535