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牛膝多肽可能通过ERK1/2途径诱导PC12细胞向神经元分化

发布时间:2024-03-24 17:02
  目的:研究牛膝多肽(ABPP)诱导PC12细胞向神经元分化的作用,初步探讨ABPP作用于PC12细胞的信号转导途径。方法:以体外培养的PC12细胞为研究模型,观察在低血清的情况下不同浓度ABPP(0.25、0.50、1.00μg/ml)诱导PC12细胞发生的形态学改变。采用免疫荧光细胞化学法,观察神经丝蛋白(NF-H)在ABPP诱导分化的PC12细胞中的表达;采用Western blot法观察ABPP(1.0μg/ml)加药后不同时间段(0、6、12h和1、2、3、7d)和不同浓度ABPP(0.25、0.50、1.00μg/ml)加药2 d后对PC12细胞ERK1/2活性的影响,同时应用ERK1/2特异性拮抗剂PD98059与ABPP共培养PC12细胞,分析ABPP对PC12细胞的作用与ERK1/2通路的关系。结果:ABPP处理3 d后,部分PC12细胞开始出现神经元样的形态。随着加药时间延长具有神经元样的细胞逐渐增多,到7 d时,可以见到神经生长因子(NGF)和ABPP处理组PC12细胞的突起都显著增多,能形成网络;14 d时,这种现象愈发显著。加药后7 d和14 d,ABPP各浓度...

【文章页数】:6 页

【部分图文】:

图1ABPP诱导PC12细胞分化14d的光镜观察结果(×400)

图1ABPP诱导PC12细胞分化14d的光镜观察结果(×400)

12细胞分化率以及细胞突起长度。结果表明,于加药后7d和14dABPP各浓度组的细胞分化率以及细胞突起长度均明显高于空白对照组(P<0.01),且存在明显的量效关系(表1)。2.2ABPP诱导PC12细胞神经元性分化的检测7d和14d后采用抗NF-H的抗体,通过免疫A:培养14d....


图2ABPP诱导PC12细胞分化14d的NF-H荧光染色结果

图2ABPP诱导PC12细胞分化14d的NF-H荧光染色结果

表1ABPP对PC12细胞分化的影响Table1EffectsondifferentiationofPC12cellsbyABPP组别ControlNGFABPP浓度(μg/ml)00.050.250.501.00视野数15151515157d细胞分化率(%)066.05±8.4....


图5PD98059对ABPP(1.0μg/ml)诱导的PC12细胞

图5PD98059对ABPP(1.0μg/ml)诱导的PC12细胞

2细胞观察ABPP介导的胞内信号转导途径,侧重研究了MAPK/ERK级联途径,以初步探讨ABPP促神经生长、维持神经元存活的可能作用机制。MAPK信号通路是参与细胞生长、发育、分裂以及细胞间功能同步等多种生理功能的最主要的p-ERK1/24244ERK1/24244Control....


图4ABPP(1.0μg/ml)不同作用时间对PC12细胞ERK1/2

图4ABPP(1.0μg/ml)不同作用时间对PC12细胞ERK1/2

03.002.502.001.501.000.500.00p-ERK1/2/ERK1/2*与阴性对照组相比,*P<0.05。图5PD98059对ABPP(1.0μg/ml)诱导的PC12细胞ERK1/2活性的影响Figure5PD98059resistanceonERK1/2ph....



本文编号:3937767

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