A型肉毒毒素(BoNT/A)表位多肽单克隆抗体的制备及其效价评定

发布时间：2024-05-12 15:51

　　目的获得高效价A型肉毒毒素(BoNT/A)表位多肽单克隆抗体。方法利用DNASTAR分析软件,结合Expasy网络服务器,综合参考多参数预测B细胞抗原表位;以多肽作为抗原制备BoNT/A Hc表位多肽单克隆抗体,并进行效价鉴定。结果以合成多肽(P1&P2)分别免疫Balb/c小鼠,获得两株单克隆抗体,经鉴定分别是IgG和IgM,效价为10-5¹0-6;检测抗体结果显示,纯度较高,特异性好。结论本研究制备出了特异性好、效价较高的A型肉毒毒素单克隆抗体,为获得抗A型肉毒毒素的快速现场检测提供技术支持。

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【部分图文】：

图11065－1296aa的DNASTAＲ分析结果

孔与阴性对照孔A450值比值＞2判为阳性。2结果2．1多参数结果本研究采用DNASTAＲ分析软件，结合国内外研究结果，根据表位预测原则:抗原性＞0，表面可及性＞1，亲水性＞0，具有柔韧性及β转角等多参数综合考虑，选取BoNT/AHC段1065－1296aa(3550－4248bp....

图2网络服务器预测结果

格为0．5mg/支。注:A:Averageflexibility方法;B:Hphob．/Hopp＆Hoods方法;C:Beta－sheet/Chou＆fasman方法;D:Beta－turn/Chou＆fasman方法;横坐标:位置;纵坐标:分值。图2网络服务器预测结果2．4Cn....

图3P1，P2表位预测结果

格为0．5mg/支。注:A:Averageflexibility方法;B:Hphob．/Hopp＆Hoods方法;C:Beta－sheet/Chou＆fasman方法;D:Beta－turn/Chou＆fasman方法;横坐标:位置;纵坐标:分值。图2网络服务器预测结果2．4Cn....

图4两株单抗效价2．7单抗纯度鉴定本试验采用硫酸铵法纯化腹水单抗，纯化回收率2C12比1D4高，可能因为纯化1D4

格为0．5mg/支。注:A:Averageflexibility方法;B:Hphob．/Hopp＆Hoods方法;C:Beta－sheet/Chou＆fasman方法;D:Beta－turn/Chou＆fasman方法;横坐标:位置;纵坐标:分值。图2网络服务器预测结果2．4Cn....

本文编号：3971545