海马齿状回过表达CLSTN1修复脆性X综合征小鼠海马依赖性记忆缺陷

发布时间：2024-05-17 23:21

　　目的本研究旨在探讨钙同线蛋白-1(Calsyntenin-1,CLSTN1)在脆性X综合症(Fragile X Syndrome,FXS)小鼠的海马依赖性记忆缺陷中发挥的作用,以及在海马齿状回中过表达CLSTN1对Fmr1 KO小鼠神经元的树突棘结构、突触连接强度,以及海马突触可塑性的影响。方法本研究分别采用Fmr1基因敲除小鼠(FVB.129P2-Pde6b+Tyrc-ch Fmr1tm1Cgr/J)(Fmr1 KO)和野生型小鼠(FVB.129P2-Pde6b+Tyrc-ch/Ant J)(WT)作为FXS的实验及对照模型,首先,采用蛋白免疫印迹法,检测Fmr1基因敲除小鼠中CLSTN1蛋白的表达水平。其次,在正常小鼠海马齿状回中,利用病毒载体干扰CLSTN1的表达检测小鼠空间记忆、恐惧记忆及社交记忆,与其焦虑和运动水平。然后,在Fmr1基因敲除小鼠海马齿状回中,利用病毒载体过表达CLSTN1检测其空间记忆、恐惧记忆及社交记忆,与其焦虑和运动水平。之后,利用病毒介导的神经元精细形态标记技术,检测在Fmr1基因敲除小鼠海马齿状回中过表达CLSTN1对颗粒细胞的树突棘结构的影响。进一步...

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3.1两月龄Fmr1KO小鼠的CLSTN1蛋白表达水平降低Figure3.1TheexpressionofCLSTN1proteinwasdecreasedintwo-montholdFmr1KOmice.

3.1海马CLSTN1表达异常与Fmr1KO小鼠海马依赖的记忆受损有关3.1.1两月龄Fmr1KO小鼠海马区的CLSTN1蛋白表达量下降Fmr1KO小鼠存在海马依赖记忆的异常[12,13]，为了确定Fmr1KO小鼠海马区的CLSTN1蛋白表....

图3.2在WT小鼠海马齿状回中注射干扰CLSTN1病毒，三周后CLSTN1蛋白表达下降Figure3.2CLSTN1downregulationthreeweeksafterinjectionofrecombinantCLSTN1

为了探讨海马区CLSTN1的表达水平降低是否的确与小鼠的海马依赖记忆受损有关，我们利用腺相关病毒及shRNA干扰技术，下调WT小鼠海马齿状回中的CLSTN1表达水平。在两月龄的WT小鼠海马齿状回中，注射干扰CLSTN1病毒[rAAV-U6-shRNA(CLS....

图3.4在Morris水迷宫测试中，注射实验并不影响WT小鼠的空间记忆

图3.4在Morris水迷宫测试中，注射实验并不影响WT小鼠的空间记忆。Figure3.4InjectionexperimentdidnotaffectspatialmemoryinWTmiceintheMorriswatermazet....

图3.5干扰CLSTN1降低WT小鼠的恐惧记忆Figure3.5DownregulationofCLSTN1reducedfearmemoryofWTmice.A.Theschema

在情境依赖性的恐惧学习记忆中WT+CLSTN1shRNA小鼠的Freezing水平显著降低（p<0.01，图3.5C）。两小时后，改变环境，在线索（声音）依赖性的恐惧学习记忆中WT+CLSTN1shRNA小鼠的Freezing水平相对WT+CLSTN1C....

本文编号：3976117