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聚肌胞苷酸、脂多糖及肽聚糖对人气道黏膜天然免疫功能影响的实验研究

发布时间:2017-06-24 07:00

  本文关键词:聚肌胞苷酸、脂多糖及肽聚糖对人气道黏膜天然免疫功能影响的实验研究,,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:目的研究聚肌胞苷酸[Poly(I:C)]、脂多糖(LPS)及肽聚糖(PGN)对人气道黏膜屏障及炎性介质表达的影响,进而了解气道黏膜对不同Toll样受体配体的天然免疫应答反应。方法采用Transwell系统培养人16HBEs气道上皮细胞建立人气道黏膜体外模型,分别给予Poly(I:C)、LPS及PGN顶侧刺激,对照组仅给予MEM+GlutaMax-Ⅰ培养基培养。通过测定跨膜电阻抗(TER)判断16HBEs细胞间的小分子通透性,测定基底侧培养液中FITC-右旋糖酐浓度判断大分子细胞通透性,用ELISA法检测干预24h后培养细胞顶侧及基底侧上清液中IL-8、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及TNF-α的蛋白含量。结果 10μg/ml Poly(I:C)导致人气道上皮细胞间TER显著降低,FITC-右旋糖酐通透性增加(P0.01),10μg/ml LPS及100μg/ml PGN刺激对气道上皮细胞TER及FITC-右旋糖酐通透性无明显影响。IL-8和TNF-α表达在Poly(I:C)、LPS及PGN组细胞顶侧和基底侧均较对照组显著增加(P0.05)。GM-CSF表达在3组细胞顶侧均较对照组增加(P0.05),仅Poly(I:C)组基底侧表达较对照组增加(P0.05),LPS和PGN组基底侧与对照组比较无明显变化。Poly(I:C)组、LPS组和PGN组细胞顶侧IL-8和GM-CSF浓度增高程度高于基底侧,形成浓度梯度。结论 Poly(I:C)可破坏气道黏膜屏障完整性,导致小分子和大分子通透性增加,同时刺激细胞定向向顶侧分泌炎性介质,LPS及PGN对气道黏膜屏障无影响,但能诱导细胞向顶侧定向分泌炎性介质,提示病毒及细菌感染所致气道炎症与Toll样受体通路介导的气道黏膜天然免疫应答有关。
【作者单位】: 第二军医大学长海医院呼吸内科;
【关键词】气道上皮细胞 聚肌胞苷酸 脂多糖类 肽聚糖 免疫 天然 免疫 黏膜
【基金】:国家自然科学基金(81100017) 上海市卫生局面上项目基金(2010065)~~
【分类号】:R392.1
【正文快照】: 人体呼吸道黏膜直接与外界相通,形成一道天然屏障抵御病原微生物的入侵[1]。作为机体防御系统的第一道防线,黏膜免疫发挥着重要作用,致病性病原体侵入机体后,首先遭遇到天然免疫的抵抗,随后产生获得性免疫,两者共同发挥防御作用[2]。病毒及细菌是引起下呼吸道感染的主要病原体

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