干扰SREBP-1c对内质网应激状态下L02和HepG2肝细胞脂质沉积的影响

发布时间：2017-06-24 21:21

  本文关键词：干扰SREBP-1c对内质网应激状态下L02和HepG2肝细胞脂质沉积的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的构建SREBP-1c基因的miRNA真核表达载体,观察其对内质网应激状态下L02和HepG2肝细胞脂质沉积的影响。方法设计并构建SREBP-1c基因的3个miRNA干扰载体,经测序鉴定miRNA载体构建成功后转染肝细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。Western blot检测转染后SREBP-1c的表达;甘油三酯测定和油红O染色检测细胞内脂质沉积;Western blot检测SREBP-1c下游脂代谢相关基因脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC1)的表达。结果靶向干扰SREBP-1c的miRNA真核表达载体构建成功。Westernblot结果显示,转染SREBP-1c-1miRNA和SREBP-1c-3miRNA载体后,L02和HepG2细胞内SREBP-1c蛋白水平表达均明显减低(P0.05),SREBP-1c-1miRNA的干扰效果最好(P0.05)。与对照组相比,转染SREBP-1c-1miRNA载体后L02和HepG2肝细胞内甘油三酯含量均明显降低(P0.05),细胞内脂滴明显减少;FAS和ACC1蛋白的表达明显降低(P0.05)。结论 SREBP-1c基因沉默通过FAS/ACC1降低了内质网应激状态下肝细胞脂质合成。
【作者单位】： 重庆医科大学附属第二医院消化内科;
【关键词】： 非酒精性脂肪肝 SREBP-c FAS 内质网应激 RNA干扰
【基金】：国家自然科学基金青年科学基金(81000357)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： 非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liverdisease,NAFLD)是近年来发现的与肥胖相关的代谢紊乱性疾病在肝脏的表现,以肝细胞脂肪变性为特征。NAFLD是导致慢性肝酶升高和隐源性肝硬化的最常见原因[1-2]。肝细胞有丰富的内质网,非酒精性脂肪肝细胞内质网处于应激状态;相反,

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