骨髓间充质干细胞的分离鉴定及向血管内皮细胞诱导分化过程中microRNA126的表达

发布时间：2017-06-25 12:11

  本文关键词：骨髓间充质干细胞的分离鉴定及向血管内皮细胞诱导分化过程中microRNA126的表达，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的建立分离大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)及将其定向诱导分化为血管内皮细胞(endothelial cells,EDCs)的方法,并通过观察microRNA126的表达规律初步探索其在定向分化中的调控作用。方法通过反复贴壁及人工分选方法进行大鼠骨髓MSCs的体外分离纯化及扩增,运用免疫荧光法检测MSCs中CD34、CD105和CD73的表达。应用MEF诱导分化培养液将MSCs定向诱导分化为EDCs,采用qRT-PCR法检测细胞诱导分化过程不同时间点EDCs特征基因CD34、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)及调控小RNA分子microRNA126的表达。结果经分离纯化的骨髓MSCs CD34呈阴性表达,CD105呈强阳性表达,CD73呈阳性表达,证实骨髓MSCs分离成功,且细胞均一性较好,占细胞总数的90%以上。MSCs定向诱导为EDCs早期分化过程中,在诱导前期第1~4天,VE-cadherin和CD34基因呈阴性表达;第5~6天VE-cadherin和CD34表达显著;第7~9天,VE-cadherin呈持续阳性表达,而CD34于第7天下降,第8~9天又呈阳性表达。microRNA126在分化过程中的表达趋势与CD34一致。结论成功建立了骨髓MSCs的分离方法及定向诱导分化为EDCs的方法;microRNA126在MSCs向EDCs的定向分化过程中可能起一定的调控作用。
【作者单位】： 第二军医大学长海医院心血管内科;生物芯片上海国家工程研究中心;上海伯豪生物技术有限公司;
【关键词】： 骨髓 间充质干细胞 内皮细胞 细胞分化 microRNA
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 间充质干细胞是来源于早期中胚层的一类多能干细胞,理论上可分化为所有中胚层来源的细胞。骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)不仅可分泌多种促进血管生长因子,且由于内皮细胞(endothelial cells,EDCs)属于中胚层,是胚胎发育过程中第1个分化的组织,因此具有分化为

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