Neuralized siRNA表达载体的构建及鉴定

发布时间：2017-06-25 16:12

  本文关键词：Neuralized siRNA表达载体的构建及鉴定，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的构建Neuralized siRNA干扰载体并观察其对细胞中Neuralized表达水平的影响。方法化学合成靶向Neuralized的短发夹寡核苷酸序列,与线性化pGPU6/Neo质粒退火连接。酶切后测序鉴定正确,转染入HEK293细胞。利用Western blot和间接免疫荧光技术分析Neuralized siRNA载体对细胞中Neuralized表达及其定位的影响。结果 Neuralized siRNA干扰载体经酶切及测序分析表明,目的核苷酸序列成功插入预计位点且序列正确;Neuralized siRNA干扰载体转染HEK293细胞后,Western blot检测显示,Neuralized siRNA干扰载体明显降低细胞中Neuralized蛋白表达;间接免疫荧光显示,转染4种Neuralized siRNA均能使定位于细胞膜上的Nneuralized蛋白的荧光强度变暗。结论 Neuralized siRNA干扰载体成功构建,且能明显抑制细胞中Neuralized的表达。
【作者单位】： 石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室生物化学教研室;
【关键词】： Neuralized SiRNA干扰
【基金】：国家自然科学基金(31060136)
【分类号】：R346
【正文快照】： Jagged1/Notch信号通路在动物进化过程中高度保守,其可以通过多种机制调节细胞的分化、增殖及凋亡过程,调控多种组织器官的正常生长发育。因此,Notch信号通路活性的改变及其受体和配体的表达失调可导致多种疾病包括肿瘤的发生,尤其在调控神经系统发育中发挥着重要的作用[1-4]

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李祥苏;吴叔明;;Jagged1/Notch在消化道肿瘤及其血管形成中的作用[J];国际消化病杂志;2011年01期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 刘锋;吕世刚;祝新根;;Notch信号通路与肿瘤血管新生[J];中国微侵袭神经外科杂志;2011年10期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郑仕杰;于洋;单伟;郑德宇;秦书俭;包翠芬;;siRNA沉默HLA-A2表达的hMSCs对人异体T淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-2功能的影响[J];解剖科学进展;2011年02期

2 李海霞;韩晶晶;张云;张振中;;靶向hTERT的特异性siRNA抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖机制研究[J];中国药理学通报;2011年05期

3 钟晨;黄瑾;;泛素连接酶对Notch信号途径的调节作用[J];现代生物医学进展;2011年20期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

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本文编号：482745