Wnt3a过表达对小鼠胚胎肝干细胞凋亡的抑制作用

发布时间：2017-06-28 02:13

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【摘要】：目的研究Wnt3a对ELSC14.5小鼠胚胎肝干细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法采用表达绿色荧光蛋白的腺病毒载体系统(Ad-GFP-Wnt3a)转入小鼠ELSC14.5细胞,以Ad-GFP组为空白对照组,Ad-wnt3a组为实验组。实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测Wnt3a及凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Mcl-1的mRNA和蛋白的表达;Hoechst33258染色法结合annexin-PE/7-ADD法检测细胞的凋亡情况。结果 qRT-PCR和Western blot结果显示,Wnt3a在ELSC14.5细胞中特异性表达,表明腺病毒系统Ad-Wnt3a能高效感染ELSC14.5细胞。与对照组相比,抗凋亡因子Bcl-2、mcl-1的mRNA和蛋白的表达显著升高(P0.05),而促凋亡因子Bax的mRNA和蛋白的表达显著降低(P0.05)。Hoechst33258染色结合annexin-PE/7-ADD法结果显示,Wnt3a高表达的ELSC14.5细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染的细胞数量很少,细胞凋亡率降低。结论 Wnt3a通过上调Bcl-2家族中抗凋亡因子和下调促凋亡因子来抑制小鼠胚胎肝干细胞的凋亡,延长其生存。
【作者单位】： 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心;重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室;
【关键词】： 胚胎肝干细胞 抗凋亡 Wnta
【基金】：国家自然科学基金(81071770,81201679)
【分类号】：R329
【正文快照】： 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界范围内最常见和最致命的癌症之一。临床上,肝癌诊疗中存在着恶性程度极高、预后极差、治疗缺乏针对性等问题[1]。因此,研究肝癌分子发病机制尤为重要和迫切。经典Wnt信号途径的异常激活会导致肝癌的发生[2]。目前,经典Wnt信号通

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本文编号：492132