含B7-H1 shRNA基因的慢病毒表达载体的制备及其抑制效果鉴定

发布时间：2017-06-28 10:19

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【摘要】：目的设计针对B7-H1的shRNA序列,构建慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒后检测其对U251细胞中B7-H1基因的沉默效果。方法设计3对针对B7-H1 mRNA的shRNA,化学合成正义链和反义链,退火后与酶切后的pLKO.1载体进行连接。测序正确后包装成病毒并感染U251细胞,分别用qRT-PCR及Western blot法检测干扰效果。结果 qRT-PCR及Westernblot结果证实设计的3条RNA干扰序列中有2条可有效沉默U251细胞中B7-H1的表达。结论所制备的针对B7-H1的shR-NA慢病毒能特异性沉默B7-H1。
【作者单位】： 第四军医大学西京医院神经外科;第四军医大学基础部免疫学教研室;海军总医院神经外科;
【关键词】： B-H shRNA 慢病毒载体 UMG细胞
【基金】：国家自然科学基金(81171924)
【分类号】：R392.12
【正文快照】： T淋巴细胞的活化及特异性细胞免疫应答的产生和维持不仅需要MHC-抗原肽复合物提供的第一信号,还需要抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC)表面的协同刺激分子分子提供的第二信号。协同刺激分子又分为两类,一类是引起细胞活化的刺激性分子,这类分子在T细胞活化阶段发挥

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