埃博拉病毒检测与分型Real-time PCR方法的建立
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【摘要】:目的建立一种致死性埃博拉病毒(EBOV)的快速检测与分型方法。方法根据苏丹型和扎伊尔型埃博拉病毒糖蛋白基因的保守区序列,设计一对通用引物及特异性TaqMan探针。通过条件优化,以10倍系列稀释质粒pblue-SG,pblue-ZG为标准品,进行Real-time PCR扩增,制作标准曲线,并进行重复性、准确性检验及特异性检测。结果 Real-time PCR检测苏丹型和扎伊尔型埃博拉病毒标准曲线相关系数均大于0.99,灵敏度可达1.0×101拷贝,高于常规PCR方法的106~107;7种其他对照烈性病病原体检测均呈阴性。结论用建立的Real-time PCR方法检测埃博拉病毒快速、灵敏、特异,重复性好,为埃博拉出血热的快速确诊奠定了基础。
【作者单位】: 吉林农业大学动物科技学院;军事医学科学院军事兽医研究所;吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室;
【关键词】: 埃博拉病毒 Real-timePCR TaqMan探针 检测方法
【基金】:农业公益性行业科研专项(No.200903037)
【分类号】:R373.9
【正文快照】: 埃博拉出血热是由埃博拉病毒(Ebola virus,EB-OV)感染引起的一种高度接触性烈性传染病,感染人类可引起严重的急性出血热,易人传人,致死率高达70%~90%[1,2]。EBOV具有囊膜,基因组不分节段,单链负股RNA,属于单负股病毒目(Mononegavi-rales)丝状病毒科(Filoviridae)丝状病毒属(F
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本文关键词:埃博拉病毒检测与分型Real-time PCR方法的建立,,由笔耕文化传播整理发布。
本文编号:509524
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