甲型副伤寒杆菌pagC基因分布及其重组表达产物免疫保护作用

发布时间：2017-07-20 19:25

  本文关键词：甲型副伤寒杆菌pagC基因分布及其重组表达产物免疫保护作用

  更多相关文章： 沙门菌 甲型副伤寒/免疫学 沙门菌 甲型副伤寒/遗传学 基因表达调控 细菌 重组 遗传 基因表达 pagC基因 重组表达 免疫原性 免疫保护性

【摘要】：目的:了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性,确定甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核重组表达产物rPagC免疫原性和保护作用。方法:采用PCR及其产物测序了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株pagC基因携带率及序列保守性。构建甲型副伤寒沙门菌pagC基因原核表达系统,Ni-NTA亲和层析法提纯表达的rPagC。采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测rPagC表达情况及其产量。采用免疫扩散法、ELISA和Western Blot鉴定其抗原性和免疫反应性。采用小鼠感染模型了解rPagC对甲型副伤寒杆菌感染的免疫保护效果,微量肥达试验检测rPagC免疫小鼠血清凝集伤寒和副伤寒沙门菌的效果。结果:所有被检测的甲型副伤寒沙门菌临床菌株均携带pagC基因,其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达99.1%～100%和98.4%～100%。所构建的原核表达系统能高效表达rPagC。rPagC免疫家兔可产生高效价抗体并能与甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生阳性Western杂交信号。ELISA结果显示,97.1%(66/68)甲型副伤寒患者血清标本rPagC抗体阳性。100μg和200μg rPagC对感染小鼠的免疫保护率分别为73.3%(11/15)和86.7%(13/15)。rPagC免疫小鼠血清对甲型副伤寒沙门菌和伤寒沙门菌H抗原凝集效价高达1∶10～1∶40。结论:pagC基因在甲型副伤寒沙门菌株中分布广泛。rPagC有良好的免疫原性及较强的免疫保护作用,可作为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原。
【作者单位】： 温州医学院检验医学院和生命科学学院;浙江医学高等专科学校;浙江大学医学院病原生物学系;
【关键词】： 沙门菌 甲型副伤寒/免疫学 沙门菌 甲型副伤寒/遗传学 基因表达调控 细菌 重组 遗传 基因表达 pagC基因 重组表达 免疫原性 免疫保护性
【基金】：浙江省卫生高层次创新人才培养工程资助项目(2012-241) 浙江省医药卫生科学研究基金资助项目(2011KYB006)
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 伤寒沙门菌(Salmonella typhi)感染引起的伤寒以及甲型副伤寒沙门菌(S.paratyphi A)、肖氏沙门菌(S.schottmuelleri)和希氏沙门菌(S.hirschfeldii)感染引起的甲、乙和丙副伤寒是常见消化道传染病[1]。近年来我国不少地区甲副伤寒发病率显著增高,已替代伤寒成为优势病种[2-3]。

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 闫梅英,梁未丽,李伟,阚飙;1995-2004年全国伤寒副伤寒的流行分析[J];疾病监测;2005年08期

2 俞连琴,骆勇;122株甲型副伤寒沙门菌鉴定及药敏结果[J];中华医院感染学杂志;2003年01期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 彭开国;张光明;王仁凡;;1949～1996年大巴山区伤寒流行特征分析[J];重庆医学;2011年31期

2 董选军;胡依红;丁文娟;;宁波市镇海区1087例伤寒流行病学分析[J];中国公共卫生管理;2007年02期

3 楼江红;吴铭宇;;舟山市2004-2008年伤寒、副伤寒流行特征分析[J];中国公共卫生管理;2011年03期

4 段丽琼;邓志红;胡世雄;白晓蓉;;1995～2004年湖南省伤寒(副伤寒)血清学型别调查分析[J];疾病监测;2006年02期

5 王鲁茜;阚飙;;伤寒、副伤寒的全球流行概况及其预防控制[J];疾病监测;2007年07期

6 刘晓青;冯子健;张静;;伤寒副伤寒防控对策研究[J];疾病监测;2008年01期

7 陈春霞;赵英伟;崔志刚;刁保卫;阚飙;;中国六省伤寒沙门菌的脉冲场凝胶电泳分析及数据库的建立[J];疾病监测;2009年08期

8 常昭瑞;张伟东;闫梅英;王子军;张静;孙军玲;;2009年全国伤寒和副伤寒监测分析[J];疾病监测;2011年04期

9 张力;樊粉霞;闫梅英;阚飙;;聚合酶链反应扩增STY3671基因鉴别伤寒与甲型副伤寒沙门菌[J];疾病监测;2012年03期

10 李永红;林玫;廖和壮;;2004-2010年广西伤寒与甲型副伤寒流行特征对比分析[J];中华疾病控制杂志;2012年02期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 孔繁林;储从家;;甲型副伤寒沙门菌的耐药现状与临床用药[A];玉溪市第八届检验医学学术年会暨科技成果推广会论文汇编[C];2005年

中国博士学位论文全文数据库 前4条

1 王鲁茜;中国伤寒和霍乱的时空分布及气候地理因素的关联性分析[D];中国疾病预防控制中心;2011年

2 张力;伤寒与甲型副伤寒沙门菌的全菌蛋白质组学比较分析[D];中国疾病预防控制中心;2009年

3 韩辉;伤寒和甲型副伤寒沙门菌遗传稳定性的实验室微进化研究[D];中国疾病预防控制中心;2010年

4 王树坤;玉溪市甲型副伤寒沙门菌遗传多样性、克隆扩散和传播控制的研究[D];云南大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 龚震宇;浙江省伤寒副伤寒流行特征与流行因素研究[D];浙江大学;2006年

2 余华丽;志贺菌和伤寒、副伤寒沙门菌药敏数据库的建立[D];四川大学;2007年

3 陈春霞;我国伤寒和甲型副伤寒沙门菌PFGE的分型研究[D];苏州大学;2008年

4 赵艳玲;我国农村饮用水质量、环境卫生状况与介水传染病发病的关系研究[D];中国疾病预防控制中心;2008年

5 刘晓青;广西桂林市校区伤寒副伤寒现场综合干预研究[D];中国疾病预防控制中心;2008年

6 杨涛;学校甲型副伤寒传播危险因素和控制措施评估[D];中国疾病预防控制中心;2008年

7 吕均;抗S. paratyphi A O2抗原单克隆抗体制备及ELISA检测方法的建立[D];华中农业大学;2008年

8 王佳佳;桂林市伤寒、副伤寒疾病发生的地理因素分析[D];桂林工学院;2008年

9 董选军;宁波市镇海区伤寒、副伤寒流行趋势及预测模型评价[D];浙江大学;2008年

10 高金霞;玉溪市红塔区伤寒、副伤寒高发危险因素研究[D];中国疾病预防控制中心;2009年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 林玫,唐振柱,董柏青,曾竣,王鸣柳,李翠云,龚健,梁大斌;1993～2002年广西伤寒、副伤寒流行特征及防治对策分析[J];华南预防医学;2003年04期

2 陶沁,何平,谢阳,潘家秀;贵州省伤寒、副伤寒流行回顾性分析[J];中华流行病学杂志;2003年08期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李楠,徐采朴,刘为纹;人TIMP-2基因逆转录病毒重组体的构建及表达[J];天津医药;2000年08期

2 田文志,白慧玲,马远方,Kevin Chua,Warren Strober,Charles C Chu;ILG1:在纽约实验室大肠杆菌菌株中发现一种与噬菌体整合酶相似的新p4(英文)[J];第四军医大学学报;2002年14期

3 伍志坚,吴小兵,侯云德;一组可提供AAV载体复制和包装功能的重组HSV-1[J];中华实验和临床病毒学杂志;2002年01期

4 何金生,王健伟,姜秀丽,王大燕,温乐英,董京芳,屈建国,洪涛;复制缺陷型重组腺病毒rvAdG1VP7免疫学效果的研究[J];安徽医科大学学报;2002年02期

5 陈建发,黄宗海,黄元媛,汤福祥,杨文宇,车小燕;简化的两步法细菌内同源重组高效制备腺病毒质粒[J];肿瘤防治杂志;2003年05期

6 冯振伟;基因敲除与肾脏[J];国外医学.泌尿系统分册;2003年06期

7 王卫东,陈正堂,李德志,段玉忠,曹正怀;放射诱导HSV-TK基因肺癌靶向性表达的研究[J];肿瘤防治杂志;2003年01期

8 谢立,黄德庄,贺立香,谢无畏,温韬;用基因重组丁型肝炎病毒抗原检测丁肝病毒IgM抗体及其初步应用[J];天津医药;2004年07期

9 朱乃军,李秋香,李冬田,孙文敏,佟惠春;含HSV1-TK基因重组腺病毒的构建及对小鼠肺癌的抑制作用[J];实用肿瘤杂志;2002年04期

10 黄涛,徐如祥,武雷,姜晓丹,邱晓忠,秦建强,余磊,许忠;脑源性神经营养因子受体trkB基因扩增和真核表达载体的构建[J];第一军医大学学报;2003年12期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 高心;庚华;钟丞;何钟勤;;殊异韦荣菌乳酸脱氢酶的基因克隆及重组表达[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];2009年

2 岳欣;刘保忠;;一种文蛤溶菌酶基因的克隆、重组表达与抑菌活性分析[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会论文摘要汇编[C];2009年

3 杨保胜;张继红;王天云;王文峰;;人血管内皮生长因子基因的克隆及在CHO细胞中重组表达[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年

4 段德义;杨慧;徐群渊;刘玉军;张进禄;;GST-GDNF融合蛋白在大肠杆菌中的重组表达[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

5 倪敏;易维京;张竹君;张阳;陈莎;胡川闽;李淑慧;;功能性重组人巨噬细胞移动抑制因子(hMIF)的研究[A];第十届全国抗炎免疫药理学学术会议论文集[C];2010年

6 王尊;冯红;;短小芽胞杆菌双组分信号DegS/DegU蛋白的重组表达与生化特性[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年

7 杨琳琳;鲍宝龙;;斑点叉尾洶CC趋化因子SCYA117的重组表达[A];中国鱼类学会2008学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年

8 吕敏娜;覃宗华;袁建丰;孙铭飞;余劲术;吴彩艳;蔡建平;;鸭疫里默氏杆菌甲羟戊酸激酶基因的序列分析与重组表达[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集（下册）[C];2009年

9 李坤;倪崖;徐万祥;宋力雯;姚康寿;张欣宗;黄荷凤;张艳铃;石其贤;;大肠杆菌重组表达的人卵透明带3肽段的功能评价[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];2007年

10 熊丽;周勇志;王欣之;张厚双;周金林;;伊氏锥虫ShTat12VSG的重组表达及其在诊断上的潜力[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年

中国重要报纸全文数据库 前6条

1 刘远志;重组人血管内皮抑制素注射液获新药证书[N];中国医药报;2005年

2 王新亚;猪疫苗研究的发展方向[N];湖南科技报;2007年

3 本报记者 郑勇军 权立通 通讯员 曲华明 马双军;麦得津：叩开生命之门[N];烟台日报;2006年

4 驻京记者 王丹;“饿死肿瘤”有望成为现实[N];医药经济报;2005年

5 何旭;四十余名浙江富豪来渝考察[N];重庆日报;2007年

6 ;上海制成治疗性乙肝疫苗[N];中华工商时报;2002年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 姜珊;两种水产动物抗菌肽的重组表达工艺优化与药理药效研究[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2011年

2 梁永利;家蝇抗菌肽基因的表达模式与重组表达[D];山东大学;2005年

3 魏洪涛;人β_2防御素的重组表达、纯化与活性分析及其mRNA在牙龈上皮的表达[D];吉林大学;2006年

4 林伟;家蚕质多角体病毒主要衣壳蛋白的鉴定及定位研究[D];中山大学;2001年

5 娄加陶;结核杆菌抗原CD8+ T细胞多表位“串珠式”肽疫苗研究[D];第二军医大学;2006年

6 李柏志;蛋白酶缺陷型毕赤酵母重组表达人血白蛋白中试发酵工艺的研究[D];吉林大学;2012年

7 沈永才;人蛋白C的研制及其相关研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年

8 张继泉;中国明对虾免疫等相关基因的克隆、重组表达与功能分析[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2005年

9 李成华;栉孔扇贝核心组蛋白的基因结构及H2A抗菌活性的研究[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2007年

10 于金录;重组表达NT4-CGRP腺相关病毒的构建及对鸡胚血管痉挛的治疗作用研究[D];吉林大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 顾玮彦;重组大肠杆菌生产肠激酶的研究[D];浙江大学;2006年

2 薛剑峰;对虾素CHP3和CHP5的原核与真核重组表达及性质研究[D];山东大学;2005年

3 董杜鹃;棉铃虫组织蛋白酶B及前导肽的重组表达及性质研究[D];山东大学;2005年

4 谢红梅;鸡传染性支气管炎S1基因在大肠杆菌中的表达及其生物活性的初步鉴定[D];山东农业大学;2006年

5 卜兴江;中国对虾组织蛋白酶L和溶菌酶的重组表达及性质研究[D];山东大学;2006年

6 朱函坪;汉坦病毒N蛋白的重组表达及其IgM直接捕捉ELISA的建立和应用[D];浙江大学;2007年

7 迟磊;牛副结核病多重组抗原间接ELISA方法的建立及应用[D];吉林农业大学;2007年

8 金凤;AccRoyalisin重组表达及产物抑菌活性研究[D];浙江大学;2011年

9 庾桦;殊异韦荣菌乳酸脱氢酶的基因克隆及重组表达[D];吉林大学;2008年

10 蒋锦琴;甲型副伤寒杆菌ompA基因分布及重组表达产物的免疫学鉴定[D];浙江大学;2010年

，

本文编号：569646