间充质干细胞生产流程中的质量控制和微生物污染风险的防控

发布时间：2017-07-27 02:22

  本文关键词：间充质干细胞生产流程中的质量控制和微生物污染风险的防控

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【摘要】：间充质干细胞(MSCs)是起源中胚层的一类多潜能干细胞,主要存在于人体结缔组织中和部分器官间质中。间充质干细胞的主要来源为骨髓、脂肪、脐带和羊膜组织。间充质干细胞在体外经特定因素诱导,可分化为脂肪、骨、神经细胞等多种组织细胞,因此具有多向分化潜能。间充质干细胞移植一般都不会引起机体的免疫反应,因此能够将间充质干细胞应用于自身免疫性疾病和替代治疗许多疾病,并具有广阔的临床应用前景。间充质细胞作为一类特殊的生物制剂药物,在生产过程中必须保证其生物活性、增殖力和分化能力,并控制端粒酶活性和原癌基因的表达;同时需要对生产过程中的外来微生物污染进行控制。本研究旨在为建立完善的间充质干细胞生产质量控制标准提供参考。
【关键词】：间充质干细胞 分化 质量控制 微生物污染
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-7
• 第一章 绪论7-9
• 1.1 论文的选题背景及研究意义7
• 1.2 国内外相关领域研究现状及分析7-8
• 1.3 论文的研究目的及课题来源8
• 1.4 论文的创新及研究内容8-9
• 1.5 研究方法9
• 第二章 间充质干细胞的质量控制研究9-31
• 2.1 问题的提出9-11
• 2.2 间充质干细胞定义及特点11-12
• 2.2.1 间充质干细胞定义11
• 2.2.2 间充质干细胞的特点11-12
• 2.3 间充质干细胞的来源及原代培养12-15
• 2.3.1 骨髓来源的间充质干细胞12-13
• 2.3.2 脐带来源的间充质干细胞(UC-MSCs)13-14
• 2.3.3 脂肪组织来源的间充质干细胞(AD-MSCs)14
• 2.3.4 羊膜组织来源的间充质干细胞14-15
• 2.4 间充质干细胞的鉴别15-20
• 2.4.1 ISCT2006年发布的最低标准及2013年发布的更新标准16-17
• 2.4.2 骨髓间充质干细胞的常用标准17
• 2.4.3 脐带间充质干细胞的常用标准17-18
• 2.4.4 脂肪间充质干细胞的常用标准18
• 2.4.5 羊膜组织脐带间充质干细胞的常用标准18
• 2.4.6 MSCs细胞鉴别标准中表面抗原的分析18-20
• 2.5 间充质干细胞的基因型分析20-21
• 2.5.1 PCR-毛细管电泳分析方法20
• 2.5.2 流式细胞仪分析方法20-21
• 2.6 间充质干细胞的细胞活率21-22
• 2.6.1 活率检测方法21-22
• 2.6.2 活率与安全性的关系（临床试验研究结果）22
• 2.7 生物学效率检测22-23
• 2.7.1 生物学效率的关键性分子22
• 2.7.2 常见的检测方法22
• 2.7.3 常见因子的效率分析机制22-23
• 2.8 细胞增殖能力检测23-24
• 2.8.1 直接检测方法23-24
• 2.8.2 间接检测方法24
• 2.8.3 增殖能力的评估分析24
• 2.9 分化潜能分析24-26
• 2.9.1 脐带间充质干细胞的分化潜能分析25
• 2.9.2 骨髓间充质干细胞的分化潜能分析25
• 2.9.3 脂肪组织间充质干细胞的分化潜能分析25-26
• 2.9.4 羊膜组织间充质干细胞的分化潜能分析26
• 2.10端粒酶26-27
• 2.10.1 端粒酶的检测方法和核心基因26-27
• 2.11 细胞核型27-28
• 2.11.1 人体细胞核型的正常变化27-28
• 2.11.2 MSC核型的观察检测方法28
• 2.12 原癌基因28-29
• 2.12.1 常见原癌基因28
• 2.12.2 原癌基因的检测28-29
• 2.13 、添加物残留分析29-30
• 2.13.1 牛血清白蛋白的检测29
• 2.13.2 胰蛋白酶含量的检测29-30
• 2.14 本章小结30-31
• 第三章 间充质干细胞生产流程中微生物污染风险的控制31-47
• 3.1 间充质干细胞的微生物污染风险控制原则和方法32-33
• 3.2 间充质干细胞的常见生产流程33-34
• 3.3 供体的微生物污染的防控34-35
• 3.3.1 移植风险人群的界定34
• 3.3.2 供体的感染性疾病筛查34-35
• 3.4 生产流程中的微生物防控35-47
• 3.4.1 细菌、真菌污染筛查35-39
• 3.4.1.1 细菌、真菌污染及其危害35-36
• 3.4.1.2 细菌、真菌的鉴别36
• 3.4.1.3 自动化系统检测方法和培养基（全自动血培养系统）36-37
• 3.4.1.4 自动化系统检测方法检测方法的分析对比37-38
• 3.4.1.5 分子诊断方法的应用38-39
• 3.4.2 支原体污染的筛查39-41
• 3.4.2.1 支原体的定义39-40
• 3.4.2.2 支原体常用检测方法40
• 3.4.2.3 分子诊断方法（PCR等）40-41
• 3.4.3 内毒素的防控和检测41-43
• 3.4.3.1 无热原材料的选择和质控42
• 3.4.3.2 细胞产物内毒素含量的测定42-43
• 3.4.4 病毒污染和检测43-45
• 3.4.4.1 病毒污染的途径43-44
• 3.4.4.2 病毒的常用检测方法44-45
• 3.4.5 未知微生物的污染及防控45
• 3.4.6 生产过程中抗生素的使用45-46
• 3.4.7 生产环境的微生物污染监控46-47
• 3.5 本章小结47
• 第四章 总结与展望47-49
• 参考文献49-55
• 致谢55-56
• 攻读学位期间发表的学术论文目录56-58

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