小鼠子宫珠蛋白结合蛋白的生物信息学分析及其多克隆抗体制备

发布时间：2017-08-04 09:29

  本文关键词：小鼠子宫珠蛋白结合蛋白的生物信息学分析及其多克隆抗体制备

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【摘要】：本文旨在制备小鼠子宫珠蛋白结合蛋白(mouse uteroglo binbinding protein,mUGBP)多克隆抗体,为后续研究工作奠定基础。通过生物信息学分析方法预测mUGBP蛋白的跨膜结构、理化特性、疏水性等因素,设计出两段多肽,分别与匙孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)交联后免疫新西兰兔,结果显示其中一个含13个氨基酸残基的多肽序列(221st～233rd)可用作抗原免疫动物,并成功获得高效价的抗mUGBP多克隆抗体。通过ELISA法检测其效价为1:108,亲和层析纯化后Westernblot检测抗体特异性,并将制备的抗体应用于免疫印迹及人和小鼠肺组织免疫组织化学和免疫荧光检测,结果显示本研究制备的抗体具有特异性,且用该抗体成功在人和小鼠气道上皮细胞和肺血管内皮细胞检测到UGBP蛋白表达。结果表明,本研究通过生物信息学方法成功预测了抗原表位,并据此预测成功制备了高效价、高特异性的抗mUGBP多克隆抗体。
【作者单位】： 中南大学湘雅医学院生理学系;长治医学院生理学教研室;
【关键词】： 子宫珠蛋白 小鼠 抗体 生物信息学
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.30670770,30870916,81100057) Precision Instruments Sharing Foundation of Central South University,China(No.2012-02,2012-12)
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 子宫珠蛋白(uteroglobin,UG)是由衬覆于远端细支气管的非纤毛上皮细胞Clara细胞所分泌的一种在进化上保守的小分子蛋白,因最早在兔的子宫内膜发现并由此命名,也称为Clara细胞分泌蛋白(Clara cell secretory protein,CCSP)、Clara细胞蛋白10(CC10)、Clara细胞蛋白16(CC16),是

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4 吴晓东;中美交流人类和小鼠全基因组功能分析研究[N];中国高新技术产业导报;2001年

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1 方志友;合成PHA基因组克隆片段的序列分析及相关基因的分离[D];安徽农业大学;2002年

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8 智建生;雌二醇和孕酮对小鼠心肌细胞超微结构的影响[D];天津医科大学;2006年

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10 成先桂;马尔尼菲青霉菌野生株和临床分离株致病力动物实验研究[D];广西医科大学;2007年

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本文编号：618850