Runx2通过抑制细胞巨自噬以诱导C2C12细胞向成骨细胞分化

发布时间：2017-08-04 23:14

  本文关键词：Runx2通过抑制细胞巨自噬以诱导C2C12细胞向成骨细胞分化

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【摘要】：目的:探讨细胞巨自噬与Runx2诱导C2C12细胞成骨分化的关系。方法:在强力霉素(doxycyc-line,Dox)诱导Runx2表达的细胞系C2C12/Runx2Dox中进行研究。Dox(10 mg/L)处理0 d、1 d、3 d及6 d后,real-time qPCR检测LC3b、Beclin-1、p62和LAMP-2表达情况,Western blotting分析LC3-I/LC3-Ⅱ比值。设置不同的3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)或雷帕霉素(rapamycin,Rap)浓度,Dox处理14 d后分析碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性。用3-MA(5 mmol/L)或Rap(10μmol/L)与Dox共同处理1 d、3 d及6 d后检测ALP及骨钙素(osteocalcin,OC)表达情况。结果:(1)C2C12细胞向成骨分化时,LC3b与Beclin-1显著下调,p62与LAMP-2无明显变化;(2)LC3-I向LC3-Ⅱ转换的过程被抑制;(3)3-MA(5 mmol/L)可增强ALP活性,而Rap(10μmol/L)则抑制其活性;(4)3-MA可上调ALP及OC表达,Rap则下调二者表达。结论:Runx2通过下调LC3和Beclin-1、抑制LC3-I向LC3-Ⅱ转换的方式阻碍自噬体形成,以诱导C2C12细胞分化为成骨细胞。
【作者单位】： 基因工程药物国家工程研究中心教育部基因组药物工程研究中心广东省生物工程药物重点实验室暨南大学生命科学技术学院生物医药研究院;
【关键词】： Runx CC细胞 成骨分化 巨自噬
【基金】：国家自然科学基金重大研究计划培育项目(No.90919050)
【分类号】：R363
【正文快照】： Runx2(又称Cbfa1、AML3或PEBPa2A)是调节成骨分化及骨发育的关键因子,由Runt结构域介导与顺式原件OSE2(5'-TGTGGT-3')结合启动靶基因转录[1]。Runx2缺陷型的纯合体小鼠缺乏骨骼矿化的能力,产后立即死亡;杂合体可存活,但骨骼系统存在缺陷[2]。Runx2过表达的转基因小鼠出现骨质

【参考文献】

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1 陈艾;童煜;毛萌;;小自噬的研究进展[J];中国病理生理杂志;2012年05期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 过华蕾;廖丽贞;陈燕玲;吴伟康;;白藜芦醇对抗D-半乳糖诱导的心肌细胞衰老及其机制[J];中国病理生理杂志;2012年12期

【二级参考文献】

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1 杜海磊;邱伟华;杨卫平;;细胞自噬与肿瘤[J];中国病理生理杂志;2010年02期

【相似文献】

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1 赵敏,许建中,周强,王序全,秦辉,朱灏,单建林;人骨髓间充质干细胞体外诱导培养成骨的实验研究[J];江西医学院学报;2004年02期

2 李军,范清宇,范德刚,张鹏,文艳华;骨形成蛋白-2基因在人骨髓基质细胞中的表达及对其成骨分化的作用[J];中华创伤骨科杂志;2004年04期

3 杜大江;高中礼;刘光耀;古川克子;牛田多加志;;不同分化程度的类成骨细胞对流体刺激的生物反应[J];中国矫形外科杂志;2006年15期

4 梁文杰;吴雪晖;谢肇;郭书权;罗飞;何清义;许建中;;猪骨髓间充质干细胞成骨分化后SLA的表达及免疫原性研究[J];免疫学杂志;2007年03期

5 野向阳;李相军;徐岩;毕薇薇;刘建国;;人脐带间充质干细胞体外成骨及其免疫学特征[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年36期

6 张金超;刘丹丹;易长青;杨梦u&;;金纳米粒子对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化功能的影响[J];科学通报;2010年06期

7 刘国栋;张霄雁;李哲海;;Wnt信号在成骨分化中的调节机制[J];内蒙古医学杂志;2010年07期

8 张磊;肖扬;吴震东;陈磊;应志豪;陈子高;;cAMP/PKA信号通路介导人脂肪干细胞成骨分化的体外试验[J];临床骨科杂志;2010年05期

9 史春民;王拥军;苗登顺;;异补骨脂素促进大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化并抑制其向脂肪细胞分化[J];南京医科大学学报(自然科学版);2011年05期

10 张月东;张开刚;;脂肪干细胞在骨组织工程中的应用研究[J];社区医学杂志;2011年10期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 刘霞;栗占国;Wei Zhu;Carl.P.Blobel;;ADAM 9、15、17基因敲除小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化研究[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年

2 苏伟;崔向荣;白鹤;;高频脉冲电磁场对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响[A];第十八届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2011年

3 王钊;金丹;;NPY受体在大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

4 祝联;何金光;麻荪香;王涛;徐华;戴传昌;董佳生;;BMPR-IB在真皮成纤维细胞成骨分化中的作用[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年

5 马剑雄;马信龙;孙晓雷;骆巍;王志钢;李稚君;;体外培养成骨细胞对自体骨髓间充质干细胞定向成骨分化的影响[A];第九届全国生物力学学术会议论文汇编[C];2009年

6 石玉;戴\戎;;周期性拉应力对间充质干细胞分化影响的研究[A];第九届全国生物力学学术会议论文汇编[C];2009年

7 马剑雄;马信龙;李稚君;孙晓雷;朱少文;;体外培养成骨细胞对自体骨髓间充质干细胞定向成骨分化的影响[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

8 曹伟杰;刘丽珍;来晓瑜;于晓虹;黄河;;霉酚酸对人骨髓来源的间充质干细胞作用的体外研究[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

9 田晶;王先酉;暨明;赵霏;王峰;周小莹;谭孟群;;rAAV-2介导GFP基因转染人骨髓间充质干细胞向成骨分化的实验研究[A];湖南省生理科学会2006年度学术年会论文摘要汇编[C];2007年

10 杨大志;郭晓东;郑启新;;β-连接蛋白在锶诱导人脐带间充质干细胞成骨分化中的作用[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 陈微微;NELL-1蛋白对小鼠ATDC5细胞软骨分化的调控机制和对人血管周细胞成骨分化作用的研究[D];浙江大学;2011年

2 刘立跃;流体剪切力影响人骨髓间充质干细胞分化的机制研究[D];浙江大学;2011年

3 杨瑞年;BMP-2因素对血管内皮细胞共培养干细胞成骨分化以及相关基因表达的影响研究[D];昆明医科大学;2012年

4 杨勇;电磁场促进骨髓间充质干细胞成骨分化及初步机制[D];华中科技大学;2010年

5 黄姗;miR-22对人脂肪组织来源间充质干细胞成脂成骨分化的调控作用及其分子机制研究[D];北京协和医学院;2012年

6 张锦芳;miR-20调控人骨髓来源的间充质干细胞成骨分化及机理研究[D];清华大学;2010年

7 李洪伟;硅酸二钙涂层离子溶液促进人骨髓间充质干细胞成骨分化及其机制的实验研究[D];苏州大学;2011年

8 杨楠;miR-21及其靶基因Sprouty1调控人骨髓间充质干细胞成骨分化的机制研究[D];第四军医大学;2012年

9 朱帮福;重组人骨形成蛋白成骨分化及其定量测活的研究[D];第四军医大学;2001年

10 王敏;MicroRNAs调控人脂肪源性干细胞成骨分化及ODN影响其调控的研究[D];吉林大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 王立媛;脱落乳牙干细胞骨向分化相关分子Runx2动态表达研究[D];天津医科大学;2011年

2 孟令仪;Osterix在间充质干细胞向成骨细胞分化过程中作用的初步研究[D];东北师范大学;2010年

3 文虹;体外联合培养体系中HUVECs对hBMSCs成骨分化的影响及其机制研究[D];昆明医学院;2011年

4 王小娜;TGF-β1在雷奈酸锶促进大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的作用[D];南方医科大学;2012年

5 侯秋科;维生素D受体介导龟板诱导的骨髓间充质干细胞向成骨分化[D];广州中医药大学;2010年

6 郑创义;缝隙连接细胞间通讯在大鼠骨髓基质细胞成骨分化中的作用[D];汕头大学;2010年

7 张晓蕾;DNA甲基化对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用[D];浙江大学;2010年

8 王明明;玻璃粘连蛋白对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响[D];青岛大学;2010年

9 王志平;脉冲电磁场对脱钙骨基质诱导人骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的影响[D];第三军医大学;2010年

10 罗嘉全;hMSCs成骨分化相关IncRNAs的筛选和鉴定[D];南昌大学;2012年

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