评价环境雄激素类化合物重组Lac Z报告基因酵母细胞的建立
本文关键词:评价环境雄激素类化合物重组Lac Z报告基因酵母细胞的建立
【摘要】:目的建立环境雄激素内分泌干扰物酵母评价体系。方法以载体双表达的方式构建该重组基因酵母细胞。在表达载体中,用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子驱动雄激素受体基因(AR)的表达,并使其与V5抗原表位相融合;在报告载体中,用雄激素效应元件(ERE)调控的Lac Z作为报告基因。将两者转化于酵母细胞(W303-1A)中,构建成雄激素调控的重组Lac Z基因酵母细胞。用不同浓度的雄激素[去氢表雄酮(DHT)和丙酸睾酮(TP)]和雌激素(雌二醇、雌三醇、雌酮、二乙基已烯雌酚和乙炔基雌二醇),对重组基因酵母细胞分别进行敏感度和特异度研究。结果去氢表雄酮和丙酸睾酮与该重组基因酵母细胞有明显的剂量效应关系,说明其具有良好的特异度,而与雌二醇、雌三醇、雌酮、二乙基已烯雌酚和乙炔基雌二醇5种雌激素化合物均无明显的剂量效应关系,说明其具有较强的特异性。结论该重组基因酵母细胞可用于对环境雄激素类化合物的筛选。
【作者单位】: 扬州大学医学院预防医学教研室;扬州大学动物科学与技术学院;
【关键词】: 酵母细胞 雄激素受体 雄性内分泌干扰物
【基金】:江苏省环境监测科研基金(0714) 2011年江苏省大学生实践创新训练计划(批准号B11129) 扬州大学2011年度大学生学术科技创新基金(33)
【分类号】:R392.12
【正文快照】: 环境内分泌干扰物(environmental endocrine dis-ruptor,EED)中有一大类是具有雄激素样活性,多数可与雄激素受体(androgen receptor,AR)结合发挥效应。除对生物体产生生殖危害外[1],还会对免疫系统产生危害。自身免疫性疾病是临床上常见的疾病,发病因素不仅决定于外环境多因
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