免疫磁珠荧光量子点技术检测结核分枝杆菌

发布时间：2017-08-07 04:11

  本文关键词：免疫磁珠荧光量子点技术检测结核分枝杆菌

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【摘要】：目的筛选结核分枝杆菌(MTB)免疫磁珠荧光量子点检测方法的最佳配体组合。方法将本室筛选获得的MTB结合肽H8和商业化抗MTB多克隆抗体(Pab)与纳米磁珠偶联,多肽H8、商业化抗MTB单克隆抗体(Mab)和抗热休克蛋白65单克隆抗体(Mabc)与荧光量子点偶联,分别获得2种免疫磁珠和三种功能化荧光量子点,两两组合用于MTB检测,通过显微镜下观察荧光信号以及激光诱导荧光仪测量荧光值,判断不同配体组合与MTB的亲和性及特异性,获得最佳组合及其检测下限。结果偶联Mabc的荧光量子点与免疫磁珠MNP-Pab组合检测MTB结果为阴性,其余5组均为阳性。测量荧光值,检测效果较好的两组组合分别是MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8,阳性荧光值与阴性对照组比值分别是4.394和3.956,检测下限均是102条菌/mL。6组组合与12种非结核分枝杆菌(NTM)的亲和性各异,而与3种非分枝杆菌均不结合。结论 MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8两组检测效果较好,与MTB亲和性较高,特异性较好,可作为MTB免疫磁珠荧光量子点检测技术的最佳配体组合。
【作者单位】： 同济大学附属上海市肺科医院结核病诊疗中心上海市结核病(肺)重点实验室;苏州大学基础医学与生物科学学院;同济大学先进材料与纳米生物医学研究院;山西省儿童医院医学检验中心;
【关键词】： 免疫磁珠 荧光量子点 分枝杆菌 结核 检测 配体
【基金】：中央高校基本科研业务费专项基金(1511219013) 上海市科委项目(No.10411955100,11nm0506100)联合资助~~
【分类号】：R378
【正文快照】： 结核病仍是威胁人类健康的主要传染病,目前市售的抗结核分枝杆菌(M.tuberculosis,MTB)抗体的特异性和敏感性均不高,因此,国内外均在寻找新的MTB标识物,建立检测MTB新方法[1-2]。近年来,纳米技术已经广泛用于普通细菌的检测中[3],在MTB检测中也开展了一些研究[4],我们利用前期

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：632772