促细胞增殖新基因TOX的功能研究
本文关键词:促细胞增殖新基因TOX的功能研究
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【摘要】:利用GenBank中的数据,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)从人的cDNA文库中克隆得到功能基因TOX(thymocyte selection-associated high mobility group box),运用生物信息学分析其结构特性,并通过逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)分析TOX在细胞系中的表达;利用荧光显微镜观察其亚细胞定位情况;使用细胞生长曲线实验和流式细胞术分析TOX对细胞增殖及细胞周期的影响.结果表明:TOX基因定位于人8号染色体q12.1上,全长4 131bp,编码526个氨基酸,该蛋白质分子质量约为57ku,含有9个外显子和8个内含子,其编码蛋白为高迁移率蛋白家族成员,能参与基因调控等生理过程;TOX基因在白血病细胞系Jurkat和Raji中高表达,并定位于细胞核中;对细胞生长曲线绘制及细胞周期分析表明,TOX能够使细胞生长速度加快,且S期细胞比例明显上升.说明TOX参与了细胞增殖调控,有可能研究开发为药物靶标或疾病标志物.
【作者单位】: 北京大学基础医学院免疫学系;北京大学人类疾病基因研究中心;国家人类基因组北方研究中心;
【关键词】: TOX基因 细胞增殖 细胞周期 药物靶标 疾病标志物
【基金】:国家“863”计划“十二五”重点项目“药靶发现与药物分子设计技术”资助(2012AA020303) 国家自然科学基金资助项目(30900730) 国家重大新药创制专项“新药研究开发关键技术研究”资助项目(2009ZX09503-004)
【分类号】:R392
【正文快照】: 人类基因组计划的完成为功能基因组计划奠定了基础,基于细胞水平的功能基因高通量筛选技术已逐渐形成和发展,并广泛应用于大量未知功能基因的研究中。通过在体外培养的细胞中过表达或抑制表达待研究的基因,分析其所产生的信号传导通路或细胞表型的改变,可直接发现一批具有重要
【参考文献】
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