CMKLR1基因缺失对DHT诱导的小鼠类PCOS模型中卵巢功能的影响

发布时间：2017-08-07 13:18

  本文关键词：CMKLR1基因缺失对DHT诱导的小鼠类PCOS模型中卵巢功能的影响

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【摘要】：多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是女性常见的内分泌紊乱疾病。Chemerin是新发现的一种脂肪分泌的细胞因子,在免疫应答、炎症反应、脂肪分化、糖代谢以及生殖生育等生理过程中均发挥重要作用。而骨形成蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)家族对雌激素,孕激素分泌有一定影响,在生殖功能中有作用。鉴于Chemerin及其受体CMKLR1在能量代谢和生殖功能中的作用,其与PCOS发生的关系也越来越受到关注。因此,本试验用高雄激素诱导小鼠形成类PCOS,利用CMKLR1基因敲除小鼠与C57BL/6J野生型小鼠,通过HE染色、RT-qPCR、免疫荧光及ELISA等方法,旨在研究CMKLR1基因在高雄激素诱导的卵巢功能障碍中的作用。获得以下研究结果:1.高雄激素诱导野生型和CMKLR1基因敲除小鼠类PCOS模型的建立利用5α-双氢睾酮(Dihydrotestosterone,DHT)处理小鼠后,小鼠发情周期紊乱,基本无发情期出现;卵巢形态结构异常,呈现多囊性改变,二级卵泡结构性萎缩,且无黄体出现,排卵障碍。表明模型建立成功。与野生型(Wild Type,WT)小鼠DHT组相比,CMKLR1-/-小鼠DHT处理组小鼠能够维持1~2个发情周期;并仍有不同发育时期的卵泡及黄体出现。表明CMKLR1基因缺失能够显著缓解由DHT诱导产生的类PCOS表征。2.CMKLR1基因缺失对DHT诱导的类PCOS模型小鼠卵巢功能的影响将模型小鼠分为WT小鼠对照组(WT-CTRL)、WT小鼠DHT处理组(WT-DHT)、CMKLR1-/-小鼠对照组(KO-CTRL)、CMKLR1-/-小鼠DHT处理组(KO-DHT)4组。结果发现:(1)4组小鼠卵巢细胞的凋亡状况,与WT-DHT组相比,KO-DHT组膜细胞和卵巢间质细胞凋亡都明显减弱。(2)对4组小鼠血清中雌激素、孕激素水平以及卵巢组织中各激素合成酶和激素受体mRNA表达量的检测发现,与WT-DHT组相比,KO-DHT组的雌激素、孕激素水平显著上升,同时激素合成关键酶的mRNA含量也相对较多。这些结果表明,CMKLR1基因缺失能够缓解DHT诱导形成的细胞凋亡及相关激素、激素受体及其合成酶水平等卵巢功能障碍。3.BMP4是否参与了CMKLR1在类PCOS模型小鼠卵巢功能中的作用检测了4组小鼠卵巢中BMPs及其受体的mRNA表达。结果发现,DHT处理之后,BMP4及ALK显著增高;与WT-DHT组相比,KO-DHT组的BMP4和ALK6显著减少。提示BMP4可能参与了CMKLR1在DHT诱导的卵巢功能障碍中的作用,在进一步的体外卵泡培养试验也得到验证。以上结果表明,CMKLR1基因的缺失,可以保护DHT对小鼠卵巢的破坏,维持小鼠的卵巢中卵泡的发育,黄体的产生,以及孕酮的分泌水平,并且部分恢复DHT造成的生理周期的紊乱,而这种作用则可能是通过BMP4信号通路发生作用的。
【关键词】：CMKLR1 多囊卵巢综合征 BMP4 卵巢功能
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R711.75;R-332
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-11
• 文献综述11-19
• 第一章 Chemerin及其受体与多囊卵巢综合征的研究进展11-19
• 1.1 多囊卵巢综合征11-14
• 1.1.1 PCOS的发病机制11-13
• 1.1.2 PCOS的临床表现13-14
• 1.1.3 PCOS的诊断14
• 1.2 chemerin及其受体14-17
• 1.2.1 Chemerin的研究背景15
• 1.2.2 Chemerin的生物学功能15-16
• 1.2.3 Chemerin受体16-17
• 1.3 Chemerin及其受体与PCOS的关系17-18
• 1.3.1Chemerin及其受体在性腺中的表达17
• 1.3.2 Chemerin及其受体对生殖功能的影响17
• 1.3.3 Chemerin及其受体与PCOS的关系17-18
• 1.4 结语18-19
• 试验研究19-39
• 第二章 高雄激素诱导野生型和CMKLR1基因敲除小鼠类PCOS模型的建立19-26
• 2.1 材料和方法19-22
• 2.1.1 试验材料19-20
• 2.1.2 试验方法20-22
• 2.2 结果22-24
• 2.2.1 小鼠发情周期鉴定及对比22
• 2.2.2 卵巢形态学鉴定22-23
• 2.2.3 不同时期卵泡统计分析23-24
• 2.3 讨论24-25
• 2.4 小结25-26
• 第三章 CMKLR1基因缺失对DHT诱导的小鼠类PCOS模型中卵巢功能的影响26-39
• 3.1 材料和方法26-30
• 3.1.1 试验材料26-27
• 3.1.2 试验方法27-30
• 3.2 结果30-37
• 3.2.1 血清中相关激素的含量变化30-31
• 3.2.2 TUNEL法检测卵巢组织凋亡变化31-33
• 3.2.3 相关激素受体检测33
• 3.2.4 激素合成关键酶的检测33-34
• 3.2.5 BMP相关基因的检测34-36
• 3.2.6 卵泡体外培养检测BMPs的相关表达36-37
• 3.3 讨论37-38
• 3.4 小结38-39
• 结论39-40
• 参考文献40-45
• 致谢45-46
• 作者简介46

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2 尧良清;邝健全;;多囊卵巢综合征相关研究的争议与探讨[J];国外医学.妇产科学分册;2002年05期

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4 林巧燕,林元;复方醋酸环丙孕酮对多囊卵巢综合征患者代谢的影响[J];中国医师杂志;2003年12期

5 傅博 ,姚琴;关于多囊卵巢综合征的问答[J];国外医学.护理学分册;2003年06期

6 ;全国多囊卵巢综合征及其相关疾病专题研讨会征文[J];现代实用医学;2003年07期

7 姚红萍;全国多囊卵巢综合征专题研讨会在南京召开[J];中华妇产科杂志;2004年02期

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9 王凤英;青少年多囊卵巢综合征的诊断和治疗[J];国外医学(计划生育分册);2004年02期

10 赵一鸣;多囊卵巢综合征治疗性研究的方法学问题及对策[J];中华妇产科杂志;2004年09期

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1 陶莉莉;陈小萍;顾正田;;中药联合复方醋酸环丙孕酮治疗多囊卵巢综合征不育的探讨[A];全国第六届中西医结合妇产科学术会议论文及摘要集[C];2002年

2 周杨;吕淑兰;;多囊卵巢综合征超声诊断进展[A];中华医学会第十次全国妇产科学术会议妇科内分泌会场（妇科内分泌学组、绝经学组、计划生育学组）论文汇编[C];2012年

3 潘文;李明明;;多囊卵巢综合征中西医治疗现状[A];2014年甘肃省中医药学会学术年会论文集[C];2014年

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6 黄艺华;叶敦敏;;多囊卵巢综合征的病因学研究现状[A];第九次全国中医妇科学术大会论文集[C];2009年

7 管群;曲军卫;吴效科;王勇;侯丽辉;曲军卫;王勇;许培;金佳丽;;不同表型的多囊卵巢综合征患者雄激素代谢的差异研究[A];第四届长三角妇产科学术论坛暨浙江省2009年妇产科学术年会论文汇编[C];2009年

8 孙立业;刘娟;孙博;毛璇;胡卫红;颜贤忠;;多囊卵巢综合征患者血浆代谢变化的研究[A];第十六届全国波谱学学术会议论文摘要集[C];2010年

9 郁琦;马良坤;;多囊卵巢综合征的特点及促排卵[A];第八次全国妇产科学学术会议论文汇编[C];2004年

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1 ;多囊卵巢综合征与不孕症[N];中国妇女报;2004年

2 ;什么是多囊卵巢综合征？[N];解放日报;2003年

3 ;多囊卵巢综合征是怎么回事[N];家庭医生报;2004年

4 曹元成;多囊卵巢综合征危害多[N];大众卫生报;2007年

5 吕斌;患多囊卵巢综合征注意减肥[N];大众卫生报;2007年

6 詹建;青春期高发多囊卵巢综合征[N];健康时报;2007年

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8 副教授 魏开敏;患了多囊卵巢综合征该怎么办[N];卫生与生活报;2007年

9 吕武;多囊卵巢综合征患者要注意减肥[N];卫生与生活报;2007年

10 冀京蕊;少女要警惕多囊卵巢综合征[N];中国中医药报;2007年

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1 王燕;多囊卵巢综合征病因学文献研究及情志致病病因探讨[D];中国中医科学院;2009年

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6 袁莉华;多囊卵巢综合征患者性激素及糖脂代谢变化与中医证候的关联性研究[D];甘肃中医药大学(原名：甘肃中医学院);2015年

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9 秦朗;GGT1、HNF1A基因在多囊卵巢综合征核心家系中的关联性研究[D];山东大学;2015年

10 谢蕾;中西医结合治疗多囊卵巢综合征的临床研究[D];湖北中医药大学;2015年

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