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低温保存脂肪间充质干细胞的生物学特性评价

发布时间:2017-08-08 14:25

  本文关键词:低温保存脂肪间充质干细胞的生物学特性评价


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【摘要】:目的探讨低温保存对小鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)体外培养的生物学特性和分化潜能的影响。方法分离、培养小鼠ADMSCs,取第3代细胞置于液氮深低温(-196℃)冻存12个月后复苏。MTT法测定ADMSCs的增殖活性;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老;免疫细胞化学方法检测细胞表面分子CD73、CD90和CD105;条件培养基诱导后,免疫荧光法检测心肌特异性肌钙蛋白(cTnT),茜素红、碱性磷酸酶和油红O染色检测成骨、成脂诱导分化潜能,Real time-PCR检测cTnT、Gata4、Ost和Runx2。未经低温保存的第3代ADMSCs为对照。结果低温保存的ADMSCs其增殖活性、衰老率与未冻存细胞比较差异无显著性(P0.05)。诱导后ADMSCs的cTnT阳性表达、茜素红、碱性磷酸酶和油红O染色呈阳性反应,冻存组与对照组比较差异无显著性(P0.05)。结论低温保存对ADMSCs体外生长特性和成心肌、成脂肪细胞、成骨细胞的分化潜能差异无显著性。
【作者单位】: 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室;新乡医学院护理学院;华中科技大学同济医学院组织学与胚胎学教研室;
【关键词】脂肪间充质干细胞 细胞分化 细胞增殖 细胞衰老 低温保存 免疫荧光 实时定量PCR
【基金】:河南省杰出创新人才计划资助项目(084200410020)
【分类号】:R329
【正文快照】: 脂肪源间充质干细胞(adipose-derived mesen-chymal stem cells,ADMSCs)由于其来源充足,获取简单,对患者损伤小等优点,已在组织工程研究和细胞治疗方面受到广泛重视。目前采用的长期保存干细胞的方法通常是低温冻存,建立细胞库,以满足在需要时进行择期自体细胞移植或者急诊同

【参考文献】

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