损伤POA和去除颈动脉窦对外周给AVP引起大鼠低温的影响

发布时间：2017-08-11 11:30

  本文关键词：损伤POA和去除颈动脉窦对外周给AVP引起大鼠低温的影响

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【摘要】：许多研究已经证明,精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)在体温调节中发挥重要的作用。中枢给AVP能引起正常动物出现低温反应,外周给AVP也可以降低正常体温。我们研究发现,内源性AVP通过AVP V1a受体参与紧张性体温调节过程,因为V1a受体阻断剂可以提高大鼠在昼光期的体核温度。有些学者已经研究了AVP引起低体温(低温)的机制,中枢L-谷氨酸离子型受体通过影响尾部散热而参与外周给AVP引起的低温。另外,颈动脉窦压力感受性反射也参与体核温度和皮肤温度的调控。我们实验室最近发现,外周给AVP引起低温反应与其能抑制机体调节性产热和提高唾液理毛行为的活动,使体表蒸发散热增加有关。棕色脂肪(brown adipose tissue,BAT)是人和动物冷适应、非战栗性产热的主要来源,参与维持体温和能量的平衡。BAT的产热主要受交感神经活动的调控。然而,关于外周给AVP引起低温反应与支配BAT交感神经活动变化的关系未见报道。因而,我们首先观察了外周给AVP对体核温度和BAT温度的影响以及与支配BAT交感神经活动变化的关系。然后,观察了损伤下丘脑视前区(preoptic area,POA)对外周给AVP引起大鼠低温反应与支配BAT交感神经放电变化的影响。最后,观察了外周给AVP对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起发热反应和支配BAT交感神经放电变化的影响。旨在探讨外周给AVP引起的降温作用与支配BAT交感神经活动变化的关系。第一部分损伤POA对外周给AVP引起大鼠低温与支配BAT交感神经放电变化的关系目的以往的研究证明,AVP可以引起啮齿类和其他哺乳动物出现低温反应,但损伤POA对外周给AVP引起大鼠的低温以及对支配BAT交感神经放电活动的影响未见报道。因而我们研究了损伤POA对外周给AVP引起大鼠低温反应以及对支配BAT交感神经放电活动的影响。方法实验用SPF级成年雄性SD大鼠(200-340 g),将大鼠放在盛有木屑垫料的塑料鼠笼中单个饲养,动物处于自由进食进水和自由活动的状态。(1)使用卡因酸(kainic acid,KA)损伤大鼠POA。在22℃的环境中,用无线遥控测温技术连续记录大鼠体温和活动的变化。上午10:00 h给大鼠腹腔注射AVP(10 ug/kg)或等容量的生理盐水,观察损伤POA对腹腔注射AVP引起大鼠体温与活动变化的影响。(2)在大鼠背部肩胛间区切开皮肤暴露支配BAT交感神经,结扎支配BAT交感神经的外周端并将其剪断,再将支配BAT交感神经中枢端放置在双极银电极上记录交感神经的放电活动。用成都泰盟软件公司生产的BL-420S生物信号采集和分析系统记录神经信号。结果(1)假手术大鼠和损伤POA大鼠腹腔注射AVP 40 min后,体核温度和BAT温度均出现明显的下降现象,但损伤POA大鼠引起的低温反应幅度明显小于假手术大鼠。(2)腹腔注射AVP后能快速降低大鼠支配BAT交感神经的活动,在注射AVP30 min后,最大抑制作用达31.6%。给药120 min后,支配BAT交感神经放电活动恢复到接近基线水平。(3)损伤POA能减弱AVP对支配BAT交感神经的活动的抑制作用,在注射AVP 30 min后,最大的抑制作用只有23.1%,给药75 min后,支配BAT交感神经放电活动恢复到接近基线水平。结论(1)POA是体温调节的重要中枢,损伤POA能够减弱AVP引起的低温反应,提示腹腔注射AVP可能通过血脑屏障“漏入”POA引起降温作用。损伤POA后并不能完全抑制AVP引起的降温反应,说明可能还有其他途径参与AVP的降温反应。(2)AVP能明显降低支配BAT交感神经放电活动,而损伤POA能明显减弱AVP对支配BAT交感神经放电活动的抑制作用,因此,外周给AVP引起的低温反应与AVP能通过POA抑制支配BAT交感神经放电活动而引起BAT产热减少有关。第二部分去除颈动脉窦对外周给AVP引起大鼠低温作用的影响目的压力感受器的兴奋能引起皮肤交感缩血管神经的紧张性,通过改变大鼠尾部血流量的变化,而调节机体散热。因此,我们研究了去除颈动脉窦对AVP引起低温的影响。旨在证明外周给AVP是否通过颈动脉窦压力感受性途径而使体温降低。方法无线传感器植入完成后,在颈部腹侧区做一正中切口,剥离颈交感神经和颈动脉鞘。在颈动脉分叉处连接的纤维组织上涂少量10%的苯酚乙醇溶液。假手术大鼠在颈部区域只做纵向切口。体温和活动的测量同上述实验方法。结果假手术大鼠腹腔注射AVP后,体温出现明显的下降现象。注射AVP 40 min后,体温平均降低达1.95±0.23℃。而去除颈动脉窦能明显减弱AVP引起的低温反应,注射AVP 40 min后,体温平均只降低1.26±0.32℃。注射生理盐水后,体温出现短暂的增加现象是由于移动动物和注射刺激引起的。结论去除颈动脉窦能够减弱AVP引起的低温反应,提示颈动脉窦压力感受器(非体温调节反射)参与外周给AVP引起的低温反应。第三部分外周给AVP对脂多糖引起的发热与支配BAT交感神经放电变化的关系目的给发热大鼠的中枢注射AVP能引起明显的退热反应,伴随着产热减少、散热增加以及体温降低。然而,外周给AVP对LPS引起大鼠发热反应的影响与支配BAT交感神经放电活动变化的关系未见报道。因此,我们观察了腹腔注射AVP对LPS引起大鼠的发热反应与支配BAT交感神经放电活动的影响。方法(1)实验用成年雄性SD大鼠,在22℃环境温度下,明暗时间各为12 h,用无线遥控测温技术连续记录大鼠的体温和活动的变化。上午10:00 h给大鼠腹腔注射LPS(50 ug/kg)或生理盐水(1 ml/kg)90 min后,又给大鼠腹腔注射AVP(10ug/kg)或等容量的生理盐水。(2)支配BAT交感神经的放电活动同上述实验方法,先记录60 min交感神经放电活动,给大鼠腹腔注射LPS(50 ug/kg)或生理盐水(1 ml/kg)90 min后,给大鼠腹腔注射AVP(10 ug/kg)或等容量生理盐水,继续记录支配BAT交感神经的放电活动510 min。结果(1)给大鼠腹腔注射LPS(50 ug/kg)引起双相发热反应。注射LPS 90 min后体温开始出现升高反应,160 min后出现第一热峰(37.86±0.21℃),270 min后出现第二热峰(38.58±0.18℃)。(2)注射AVP能迅速翻转LPS的发热反应,使体温下降1.82℃,降温反应持续105 min。注射AVP则使对照组大鼠体温下降达2.32℃,降温反应持续超过120 min。与AVP对正常大鼠降温效应相比,AVP对LPS发热大鼠的降温效应恢复时间快。(3)腹腔注射LPS 90 min后,支配BAT交感神经活动明显增加,并引起双相增加反应。注射LPS 160 min后交感神经放电活动出现第一高峰期,280 min后出现第二高峰期。(4)腹腔注射AVP(10 ug/kg)能明显减弱LPS对支配BAT交感神经的兴奋作用。结论本实验结果表明:(1)给大鼠腹腔注射LPS(50 ug/kg)引起双相发热反应与支配BAT交感神经放电活动出现双相增加反应有关。(2)外周注射AVP(10ug/kg)明显减弱LPS对支配BAT交感神经活动的兴奋作用,提示外周给AVP引起的退热作用与AVP能够抑制LPS发热大鼠支配BAT交感神经放电活动有关。
【关键词】：下丘脑视前区 精氨酸加压素 低温 交感神经放电 颈动脉窦压力感受器 血压 精氨酸加压素 低温 精氨酸加压素 脂多糖 发热 交感神经放电
【学位授予单位】：成都医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R363
【目录】：

• 摘要6-10
• Abstract10-16
• 前言16-20
• 第一部分 损伤POA对外周给AVP引起大鼠低温与支配BAT交感神经放电变化的关系20-47
• 1 材料与方法20-32
• 1.1 实验动物20
• 1.2 实验试剂及配制20-21
• 1.3 实验器材21-22
• 1.4 腹腔植入无线遥测温度传感器22-23
• 1.5 体温和活动的记录23-24
• 1.6 损伤POA方法24-28
• 1.7 腹腔植入双探头无线遥测温度传感器28-29
• 1.8 体核温度和BAT温度的记录29
• 1.9 记录支配BAT交感神经的放电活动29-31
• 1.10 实验分组与步骤31-32
• 1.11 统计学方法32
• 2 结果32-43
• 2.1 损伤POA对外周给AVP引起大鼠低温反应与活动变化的影响32-36
• 2.2 损伤POA对外周给AVP引起的低温反应与BAT温度变化的关系36-38
• 2.3 损伤POA对外周给AVP引起支配BAT交感神经放电变化的关系38-43
• 3 讨论43-47
• 第二部分 去除颈动脉窦对外周给AVP引起大鼠低温作用的影响47-54
• 1 材料与方法47-48
• 1.1 实验动物47
• 1.2 实验试剂及配制47
• 1.3 腹腔植入无线遥测温度传感器47
• 1.4 去除颈动脉窦方法47-48
• 1.5 实验分组与步骤48
• 1.6 统计学方法48
• 2 结果48-51
• 2.1 去除颈动脉窦对外周给AVP引起大鼠体温变化的影响48-50
• 2.2 去除颈动脉窦对外周给AVP引起大鼠活动变化的影响50-51
• 3 讨论51-54
• 第三部分 外周给AVP对脂多糖引起的发热与支配BAT交感神经放电变化的关系54-63
• 1 材料与方法54-56
• 1.1 实验动物54
• 1.2 实验试剂及配制54
• 1.3 腹腔植入无线遥测温度传感器54
• 1.4 记录支配BAT交感神经放电活动54-55
• 1.5 实验分组与步骤55
• 1.6 统计学方法55-56
• 2 结果56-59
• 2.1 LPS对正常大鼠体温的影响56
• 2.2 外周给AVP对LPS引起大鼠发热反应的影响56-59
• 2.3 外周给AVP对LPS引起发热大鼠支配BAT交感神经放电活动变化的影响59
• 3 讨论59-63
• 结论63-64
• 参考文献64-68
• 文献综述68-77
• 参考文献74-77
• 攻读学位期间的研究成果77-78
• 致谢78

【参考文献】

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本文编号：655873