弓形虫MIC2胞质尾段蛋白及其多克隆抗体的制备

发布时间：2017-08-12 14:08

  本文关键词：弓形虫MIC2胞质尾段蛋白及其多克隆抗体的制备

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【摘要】：目的:制备弓形虫微线体蛋白2胞质尾段(MIC2C)蛋白片段及其多克隆抗体。方法:以弓形虫cDNA文库为模板,PCR扩增135bp MIC2C基因片段,构建MIC2C/pGEX-4T-1原核表达系统;IPTG诱导表达GST-MIC2C融合蛋白;用纯化的融合蛋白加免疫佐剂背部皮内注射免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,亲和层析纯化并分析抗体的效价。结果:构建了MIC2C原核表达系统,表达并纯化了GST-MIC2C融合蛋白,蛋白的浓度为3.07mg/ml;获得了抗该蛋白的兔源性抗血清,纯化后的多克隆抗体效价为1:16 000。结论:在体外制备并纯化了GST-MIC2C融合蛋白及其多克隆抗体,为后续弓形虫入侵机制的研究奠定了基础。
【作者单位】： 新乡医学院药理学教研室;新乡医学院寄生虫学教研室;中山大学中山医学院寄生虫学教研室;
【关键词】： 刚地弓形虫 微线体蛋白 胞质尾 多克隆抗体
【基金】：河南省科技攻关计划项目(112102310209) 河南省教育厅自然科学研究项目(2012B310019) 新乡医学院博士科研启动基金(2010)资助
【分类号】：R382.5
【正文快照】： 弓形虫(Toxoplasma gondii)是人兽共患弓形虫病的病原体[1]。到目前为止,弓形虫主动入侵宿主细胞的机制尚未完全阐明。已有研究表明微线体蛋白(microneme protein,MICs)在弓形虫入侵过程中发挥重要作用[2]。为全面揭示弓形虫的入侵机制,本研究制备MIC2胞质尾(cytosolic tail d

【二级参考文献】

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1 郑斌,余南,李卓雅,郑焕钦,何蔼,詹希美;弓形虫致密颗粒蛋白基因的表达及其重组蛋白免疫反应性的评价[J];中国人兽共患病杂志;2005年02期

【相似文献】

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1 孙新;刚地弓形虫悬浮和粘附细胞培养的比较研究[J];蚌埠医学院学报;1995年01期

2 翁少鹏;刚地弓形虫微孔的内噬作用[J];国外医学.寄生虫病分册;1995年01期

3 刘霞 ,沈大康;刚地弓形虫三毒力株的生长特性[J];国外医学.寄生虫病分册;1998年03期

4 毛佐华;刚地弓形虫肌动蛋白解聚因子的克隆及特性[J];国外医学.寄生虫病分册;1998年03期

5 张晓丽;刚地弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)的蛋白组成及免疫化学特性[J];国外医学.寄生虫病分册;2002年01期

6 王琴美;;慢性刚地弓形虫感染小鼠的脑氨肽酶活力[J];国际医学寄生虫病杂志;1990年01期

7 徐大为;刚地弓形虫的嘧啶补救途径[J];国际医学寄生虫病杂志;1993年05期

8 邓艳琴;感染刚地弓形虫猪体内抗体水平与所分离虫株致病性的关系[J];国外医学.寄生虫病分册;1995年02期

9 阎玉文;IgE在免疫损伤大鼠弓形虫病中的保护性作用[J];国际免疫学杂志;1989年02期

10 吴增强;;刚地弓形虫包囊的优势抗原鉴定[J];国际医学寄生虫病杂志;1991年03期

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1 魏庆宽;张佃波;李瑾;傅婷霞;柏雪莲;崔勇;王洪法;付斌;刘玉冰;宰德福;黄炳成;刘克义;韩广东;;抗弓形虫感染DNA疫苗的研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年

2 魏庆宽;李瑾;傅婷霞;柏雪莲;崔勇;王用斌;张佃波;王洪法;付斌;刘玉冰;宰德福;黄炳成;刘克义;韩广东;;抗弓形虫感染DNA疫苗的研究[A];山东预防医学会第二届学术年会论文汇编[C];2006年

3 吴q;陈晓光;彭鸿娟;李华;;刚地弓形虫SAG1基因的克隆及在大肠杆菌中的初步表达[A];中国动物学会第七届全国青年寄生虫学工作者学术讨论会论文摘要集[C];2002年

4 吴伟;耿彬;王述Y，

本文编号：661972