慢病毒介导的敲低UBC9表达抑制ERβ类泛素化修饰水平

发布时间：2017-08-13 05:33

  本文关键词：慢病毒介导的敲低UBC9表达抑制ERβ类泛素化修饰水平

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【摘要】：目的建立稳定敲低UBC9蛋白表达的293T细胞株,检测其对雌激素受体β(ERβ)类泛素化修饰水平的调节作用。方法构建4条针对人UBC9基因的慢病毒短发夹RNA(shRNA)的干扰载体,将其与慢病毒包装辅助质粒共转染293T细胞后,收集病毒上清,感染293T细胞,经嘌呤霉素(puromycin)筛选后获得稳定表达慢病毒介导UBC9 shRNA的混合细胞集落,分别用实时(real-time)PCR和Western印迹方法检测UBC9的表达情况,瞬时转染方法检测UBC9表达水平对ERβ类泛素化修饰水平的影响。结果建立了稳定敲低UBC9的293T细胞株,UBC9降低能够抑制ERβ类泛素化修饰水平。结论 UBC9在ERβ类泛素化修饰反应中发挥重要作用。
【作者单位】： 军事医学科学院生物工程研究所;
【关键词】： 慢病毒属 UBC ERβ 类泛素化修饰 RNA干扰
【基金】：北京市自然科学基金资助项目(7112101) 国家973计划资助项目(2011CB504200)
【分类号】：R373
【正文快照】： 雌激素受体(ER)属于核受体超家族成员,为典型的配体(雌激素)依赖性转录因子。迄今共发现两类ER:ERα和ERβ,它们为不同基因编码的产物,结构上高度同源。和ERα类似,ERβ与配体结合后可通过基因组模式以及快速的非基因组模式发挥作用[1,2]。ERα和ERβ有相同的也有各自特异的

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本文编号：665654