cPKCγ在HPC抗N2a细胞OGD损伤中作用及其分子机制

发布时间：2017-08-13 14:28

  本文关键词：cPKCγ在HPC抗N2a细胞OGD损伤中作用及其分子机制

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【摘要】：目的在离体细胞水平,探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)对抗小鼠成神经瘤细胞(N2a)氧糖剥夺(OGD)损伤中作用及其可能的细胞分子机制。方法建立N2a细胞HPC和OGD模型,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、原位末端标记(TUNEL)和蛋白印迹(Western blot)几种方法,分别检测N2a细胞损伤、坏死、凋亡和自噬水平。结果 OGD 2和4 h可使N2a细胞的生存率显著降低、死亡率明显增高(P0.05,n=6);HPC(20 min)明显改善OGD 3 h对N2a细胞的损伤作用,而cPKCγ抑制剂Go6983(6 nmol/L)则显著解除HPC对OGD细胞的保护作用(P0.05,n=16);OGD 3 h明显增加N2a细胞的凋亡数目(P0.05,n=6),但HPC和Go6983+HPC均不能明显影响OGD细胞凋亡水平;OGD 3 h显著提高N2a细胞的自噬水平,Go6983和HPC+Go6983均可明显降低OGD细胞的自噬水平(P0.05,n=6),而HPC则对OGD细胞的自噬水平无明显影响;HPC明显改善OGD 3 h致N2a细胞坏死的程度,而Go6983则可解除HPC的保护作用(P0.05,n=16)。结论在离体细胞水平证实了cPKCγ在HPC改善N2a细胞OGD损伤中的作用,且这种作用主要与降低OGD细胞的坏死水平有关。
【作者单位】： 首都医科大学神经生物学系北京脑重大疾病研究院;
【关键词】： 低氧预适应(HPC) 氧糖剥夺(OGD) 细胞凋亡 细胞自噬 细胞坏死
【基金】：国家自然科学基金(31071048,31171147) 国家重点基础性研究项目(2012CB18200) 科技部973计划前期研究专项(2011CB512109)
【分类号】：R363
【正文快照】： 国内外研究数据显示,血管相关性疾病位于国民死亡原因之首,其中脑卒中作为一种高致死、高致残性疾病,给各国家庭和社会带来了巨大的经济损失和精神负担[1-2]。然而,目前临床对脑卒中的治疗尚缺乏有效的治疗措施[3-4]。缺血/低氧预适应(I/HPC)可提高组织器官对继发严重缺血/低

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