以重组B群脑膜炎奈瑟菌fHBP为载体的结合疫苗制备及免疫原性研究

发布时间：2017-08-16 16:20

  本文关键词：以重组B群脑膜炎奈瑟菌fHBP为载体的结合疫苗制备及免疫原性研究

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【摘要】：目的:以重组B群脑膜炎奈瑟菌(Nesseria meningitidis,Nm)外膜蛋白fHBP(recombinant factorH binding protein,rfHBP)为载体与C群多糖(group C meningococcal polysaccharide,GCMP)共价结合制备结合疫苗并免疫小鼠,检测小鼠血清中针对B群和C群Nm的杀菌抗体,评价该重组蛋白作为结合疫苗载体的可行性及该结合疫苗对B群Nm的交叉保护性。方法:扩增fhbp并连接到pET30a(+)表达载体上,转化至大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍亲和层析柱纯化rfHBP,CNBr活化法将rfH-BP与GCMP共价结合,制备结合疫苗,免疫小鼠,间接ELISA法检测血清中GCMP抗体和rfHBP抗体滴度,TTC法检测结合物诱导的分别针对B群和C群Nm的杀菌抗体水平。结果:成功扩增fhbp并连接至pET30a(+)表达载体上,大肠杆菌中诱导表达rfHBP,纯化后与GCMP结合。结合物免疫小鼠后,检测到的针对GCMP的IgG抗体滴度与GCMP组比较有明显加强效应;三针免疫后,针对C群Nm的杀菌抗体滴度高于GCMP对照组,有统计学意义(P0.05);针对B群Nm的杀菌抗体滴度与rfHBP对照组间无统计学意义(P0.05);两组结合物诱导的分别针对B群Nm CMCC29361株和ATCC700111株的杀菌抗体滴度间无统计学意义(P0.05)。结论:结合疫苗免疫小鼠后检测到的针对C群Nm的杀菌抗体高于单独GCMP组,证明该重组蛋白可作为结合疫苗的载体蛋白;且在结合过程中较好地保留了蛋白的免疫原性,对B群Nm有良好的交叉保护作用。
【作者单位】： 河北北方学院病原生物学和免疫学研究所;北京卫信天成生物科技有限公司;
【关键词】： B群脑膜炎奈瑟菌 结合疫苗 H因子结合蛋白
【分类号】：R392
【正文快照】： 脑膜炎奈瑟菌(Nesseria meningitidis,Nm)是专一人致病的革兰阴性双球菌,依据荚膜多糖的化学和免疫学性质,可分成13个血清型,荚膜多糖形成是其致病的重要条件。95%以上的病例为A,B,C,Y和W135这5个血清型所致[1-2]。该菌通常定植在人的鼻咽部,通过呼吸道传染。在世界范围内流行

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本文编号：684271