miR-19b转基因小鼠的构建及表型分析
本文关键词:miR-19b转基因小鼠的构建及表型分析
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【摘要】:目的:构建心肌细胞特异性过表达miR-19b的转基因小鼠,并对其进行表型分析。方法:先确定载体插入的酶切位点,根据CloneEZ汶RPCR Cloning Kit重组原理设计相应引物,以小鼠基因组为模板克隆出带有miR-19b前体序列(pre-miR-19b)的目的片段,利用重组酶连接到带有alpha-MHC启动子的载体上。将所得载体线性化后,采用显微注射方法注射到小鼠胚胎干细胞内。再将所得的重组胚胎干细胞移植入假孕的C57BL/6J雌鼠子宫内,在所得的子代,即Founder小鼠中采用特异的引物鉴定出转基因小鼠,并选出相应的品系,进行表型分析。结果:成功构建miR-19b转基因小鼠,且miR-19b转基因小鼠舒张期室间隔厚度、舒张期左室游离壁厚度以及射血分数均有升高。结论:心肌特异性过表达miR-19b可以导致心脏肥大。
【作者单位】: 南京医科大学附属南京市妇幼保健院儿科;
【关键词】: 转基因小鼠 心脏肥大 miR-b 心血管疾病
【基金】:国家自然科学基金(81070500) 江苏省医学重点人才基金项目(RC2011021)
【分类号】:R-332
【正文快照】: microRNAs(miRNA)是真核细胞中一种21~25个核苷酸、参与转录后基因调控的非编码单链小分子RNA,可特异性识别靶基因mRNA的3′-非翻译区(3′-UTR)并与之结合,引起靶基因mRNA的降解或翻译抑制,从而对基因进行转录后表达调控,调节许多重要的细胞活动[1]。目前已经发现了千余种miR
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,本文编号:701840
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