人脂肪间充质干细胞的分离培养及冻存前后生物学变化

发布时间：2017-08-20 15:30

  本文关键词：人脂肪间充质干细胞的分离培养及冻存前后生物学变化

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【摘要】：目的有效地分离并扩增人脂肪间充质干细胞(hADSCs),并观察冻存前后hADSCs的一般生物学特征。方法采用Ⅰ型胶原酶消化的方法从抽脂手术废弃的脂肪组织中分离hADSCs,接种在人脂肪间充质干细胞完全培养基中培养。采用胰酶消化法传代扩增,取处于生长对数期的第3代细胞,以液氮冻存6个月。复苏后以台盼蓝染色检测细胞存活率,MTT法描绘细胞生长曲线;以流式细胞仪检测冻存前后细胞表面分子CD44、CD105、CD29、CD73、CD31、HLA-DR的表达水平。结果细胞大小均等,呈长梭形漩涡状生长。复苏后细胞存活率可达(91.25±3.02)%;冻存前后细胞生长曲线无明显差别,均呈"S"形;经过2～3d潜伏期后进入增殖期,7d后进入平台期。冻存前CD44、CD105双阳性细胞占(99.850±0.001)%,CD29、CD73双阳性细胞占(92.600±0.028)%,CD31阳性细胞占(4.186±0.010)%,HLA-DR阳性细胞占(1.02±0.007)%;冻存后CD44、CD105双阳性细胞占(98.060±0.028)%,CD29、CD73双阳性细胞占(91.224±0.041)%,CD31阳性细胞占(3.832±0.009)%,HLA-DR阳性细胞占(1.514±0.006)%。冻存前后上述6种hADSCs表面分子表达水平差异均无统计学意义(P0.05)。结论来源于人的脂肪间充质干细胞易于体外培养扩增和冻存,复苏后存活率高,一般生物学特征无明显变化,可用作组织工程的种子细胞。
【作者单位】： 温州医学院附属第一医院神经内科;
【关键词】： 人脂肪间充质干细胞 流式细胞仪 冻存 分离 生物学特征
【基金】：浙江省自然科学基金(NO.Y2101091)
【分类号】：R329
【正文快照】： 人脂肪间充质干细胞(human adipose-derivedstem cells,hADSCs)最初是由Zuk等[1]从人脂肪组织中分离得到的一种具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞[2]。hADSCs在一定条件下可以分化成脂肪细胞、成骨细胞、骨细胞、肌细胞、神经细胞等,并且具有特殊的免疫调节作用[3],常

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本文编号：707448