TcpC通过促进活性氧的产生诱导巨噬细胞凋亡

发布时间：2017-08-22 16:47

  本文关键词：TcpC通过促进活性氧的产生诱导巨噬细胞凋亡

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【摘要】：目的:研究含有Toll/interleukin 1 receptor结构域的蛋白(TcpC)对巨噬细胞凋亡的影响,探讨TcpC诱导巨噬细胞凋亡的分子机制。方法:通过Transwell将分泌TcpC的尿路致病大肠埃希菌CFT073野生株(TcpCwt)和敲除tcpc基因的CFT073突变株(TcpCmut)与小鼠巨噬细胞系J774A隔开共培养,Annexin V/PI双染法观察不同数量和不同处理时间的TcpCwt和TcpCmut对J774A细胞凋亡的影响;活性氧染色观察不同处理时间的TcpCwt和TcpCmut对J774A细胞内活性氧水平的影响,Annexin V/PI双染法观察不同浓度N-乙酰半胱氨酸清除活性氧后TcpCwt和TcpCmut对J774A细胞凋亡的影响,Western blot法检测0.1 mmol N-乙酰半胱氨酸处理前后与TcpCwt和TcpCmut共培养的J774A细胞内caspase-3表达。结果:与对照组和TcpCmut组相比,TcpCwt在细菌数量为5×105和5×106以及处理时间为24 h和36 h时均可显著促进J774A凋亡(均P0.01)。共培养24 h和36 h的TcpCwt组J774A细胞内活性氧水平显著高于对照组和TcpCmut组(均P0.01)。0.1 mmol和1 mmol N-乙酰半胱氨酸处理可显著抑制TcpCwt对J774A细胞的促凋亡作用(均P0.01)。TcpCwt处理可显著降低J774A细胞内总caspase-3表达,而N-乙酰半胱氨酸处理可抑制与TcpCwt共培养的J774A细胞内caspase-3裂解,提高总caspase-3表达水平。结论:TcpC可促进巨噬细胞内活性氧产生,进而介导巨噬细胞凋亡。
【作者单位】： 浙江大学城市学院医学院;
【关键词】： 肠致病性大肠杆菌 巨噬细胞 活性氧 细胞凋亡 小鼠 基因敲除 细胞 培养的
【基金】：浙江省医药卫生科技计划(2013KYA149) 浙江大学城市学院大学生科研项目(XZ2013562106)
【分类号】：R392
【正文快照】： 肾盂肾炎是最常见的上尿路感染,尿路致病性大肠埃希菌是其主要病原体[1]。近年研究发现,尿路致病性大肠埃希菌CFT073菌株可分泌一种含有Toll/interleukin 1 receptor(TIR)结构域的蛋白(TIR domain-containingprotein,TcpC),其与髓样分化蛋白88(MyD88)结合,可阻断Toll样受体(TL

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本文编号：720270