采用弓形虫T7噬菌体文库筛选黏附相关蛋白基因的研究

发布时间：2017-08-24 07:22

  本文关键词：采用弓形虫T7噬菌体文库筛选黏附相关蛋白基因的研究

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【摘要】：目的用原代培养的猫肠上皮细胞(IECs)对已构建的弓形虫T7噬菌体展示文库进行筛选,期望得到将新的弓形虫入侵宿主细胞黏附相关蛋白基因。方法将猫IECs与混有噬菌体文库的DMEM培养基孵育培养后进行洗脱筛选,再与宿主菌BLT5403共同培养扩增文库,筛选噬菌体DNA并进行基因序列测定与分析。结果洗脱下的噬菌体滴度从第1轮7.6×105到第5轮的3.6×107,富集了230倍,非特异性结合和亲和力低的噬菌体被成功去除;核苷酸序列分析表明含插入片段为394bp的噬菌体富集量最大,经检索为弓形虫棒状体蛋白基因,是棒状体蛋白基因ROP2和ROP8的共有序列。结论初步证明弓形虫棒状体蛋白为黏附相关蛋白基因,其表达产物为ROP2。
【作者单位】： 山东省医学科学院山东省寄生虫病防治研究所;济南大学;
【关键词】： 弓形虫 猫肠上皮细胞 噬菌体 黏附蛋白 棒状体蛋白
【基金】：山东省自然科学基金项目(No.ZR2010HQ062)
【分类号】：R392
【正文快照】： 刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)属于专性细胞内寄生原虫,呈世界性分布,能够感染几乎所有温血动物及人类。弓形虫生活史复杂,宿主感染谱广泛,猫及其他猫科动物是弓形虫生活史中的唯一终末宿主[1]。有性生殖也只限于在猫科动物肠道上皮细胞(IECs)内进行。猫感染弓形虫后可排出大

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本文编号：729951